Keywords: microrna, RQ-PCR, Endogenous control genes, Dendrosomal curcumin, Hepatocellular carcinoma
|
|
- Merry Norman
- 5 years ago
- Views:
Transcription
1 Original Article Comparison of snrna-u6 and microrna-16 for Identification of Suitable Endogenous Control Gene for microrna Gene Expression Analysis under Dendrosomal Curcumin Treatment in Hepatocellular Carcinoma Cell Lines Mina Zamani 1, Majid Sadeghizadeh 2*, Mehrdad Behmanesh 3 1- M.Sc., Department of Genetics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran 2- Professor, Department of Genetics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran 3- Associated Professor, Department of Genetics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran *Corresponding Address: P.O.Code: , Department of Genetics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran sadeghma@modares.ac.ir Received: 25/Jun/2014, Accepted: 27/Dec/2014 Abstract Objective: MicroRNAs (mirnas) are single-stranded small RNAs nucleotides in length that regulate gene expression through translational inhibition and mrna cleavage. Aberrant expression of mirnas contribute to several diseases. This has increased interest in profiling the expressions of these molecules. Real-time quantitative PCR (RQ-PCR) is a sensitive, quantitative technique for gene expression assessment. To correct for systematic variables such as the amount of starting template, RNA quality and enzymatic efficiencies, RQ-PCR data is commonly normalized to an endogenous control gene which is stably-expressed across the test sample set. To avoid occurring further error in the quantification of gene expression data, it is necessary that candidate endogenous controls be validated in the samples of interest. In this study the expression of mirna-16 and small nuclear RNA (snrna)-u6 in hepatocellular carcinoma (HCC) cell lines under dendrosomal curcumin treatment were evaluated to identify appropriate endogenous controls for dendrosomal curcumin-related mirna expression assays. Methods: HCC cell lines were treated with dendrosomal curcumin. Dendrosomal curcumin entry into HepG2 and HuH-7 cells was assessed by fluorescent microscopy images. RNA was extracted and cdna, after polya polymerization, was synthesised. Then, we performed gene expression assays using RQ-PCR. Results: In this treatment condition, mirna-16 for HepG2, snrna-u6 and the combined mirna-16 and snrna-u6 for HuH-7 were suitable endogenous controls. Conclusion: These genes are appropriate endogenous controls for mirna expression assays in HCC cell lines under treatment with dendrosomal curcumin. There are stable, non-significant expression changes of these genes. Keywords: microrna, RQ-PCR, Endogenous control genes, Dendrosomal curcumin, Hepatocellular carcinoma Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, Vol. 18 ( ), No. 1, Pages: Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, Vo.l 18 ( ), No. 1 76
2 مقال اصیل مقايسة snrna-u6 ي microrna-16 برای تعییه ژن کىترل درينزاد مىاسب برای بررسی بیان ژن ای microrna تحت تیمار ک رک میه دودريزيمی در رد ای سل لی سرطان کبد 3 *2 یزاده مهرداد بهمنش 1 مینا زمانی مجید صادق چكيذ 1- کبرشنبسی ارشد گزوه ژنتيك دانشكده علوم سيستی دانشگبه تزبيت مدرس تهزان ايزان 2- استبد گزوه ژنتيك دانشكده علوم سيستی دانشگبه تزبيت مدرس تهزان ايزان 3- دانشيبر گزوه ژنتيك دانشكده علوم سيستی دانشگبه تزبيت مدرس تهزان ايزان *آدرس نويسنده مسئول: ايزان تهزان کدپستی: دانشگبه تزبيت مدرس دانشكده علوم سيستی گزوه ژنتيك sadeghma@modares.ac.ir دريبفت مقبله: 93/44/44 ذف: microrna ب RNA ب ٢ و چه ته سؿت ا ٢ ثب پذيزش مقبله: 93/14/ و ئ ت ٥ ذ اػت و ثاب ابس تشخ ا ثاشؽ mrna دس ت ظ ٥ ث ٥ ب ط ؿشوت داسد. ث ٥ ب ب دبس microrna ب اص ػ ا سخذاد ث ٥ بس ٢ ب ٢ خت ف اػت وا ا ٤ ا ؼائ ػ لا ث ثشسػ ٣ ب ١٤ ث ٥ ب آ ب سا افاض د اػات. RQ-PCR تى ٥ ىا ٣ و یا ٣ اؼابع دس ثشسػا ٣ ث ٥ اب ط بػات. ثاشا ٢ تلا ٥ تغ ٥٥ شات ػ ٥ ؼت بت ٥ ه اص خ ٥ ضا ا ٢ آغبص ٤ و ٥ ف ٥ ت RNA وبسآ ٣٤ آ اض ٤ اب داد اب ٢ RQ-PCR ؼاجت ثا ٤ اه ط و تش دس صاد و دس د ػ ب ٢ آص ث س پب ٤ ذاس ث ٥ اب ا ٣ ؿا د اػاتب ذاسدػابص ٢ ا ٣ ؿا د. ثاشا ٢ خ ا ٥ ش ٢ اص سخذاد خ ب ب ٢ ث ٥ تش دس ص ١ ٥ و ی ٣ ػبص ٢ داد ب ٢ ث ٥ ب اسص ٤ ابث ٣ ط اب ٢ و تاش دس صاد وب ذ ٤ اذ ثاشا ٢ اش ا ١ آص اب ٤ ؾ هش س ٢ اػت. دس ا ٤ ب ؼ ث ٥ ب ط ب ٢ microrna-16 snrna-u6 دس سد ب ٢ ػ ٣ ػش ب ٣ وجذ ت ات ت ٥ ابس ثاب و سو ٥ د ذس ص ٣ ث ظا س تؼ ٥ ا ٥ و تاش دس صاد بػات ثاشا ٢ ب ؼابت ػا دؾ ث ٥ اب microrna اب اشتجي ثاب و سو ٥ د ذس ص ٣ اسص ٤ بث ٣ ؿذ. م اد ي ريش ا: سد ب ٢ ػ ٣ سد ظش ت ػي و سو ٥ د ذس ص ٣ ت ٥ بس ؿذ ذ. س د و سو ٥ د ذس ص ٣ ث سد اب ٢ ػ ٣ HuH-7 HepG2 ثب تل ٤ شثشداس ٢ ت ػي ٥ ىش ػاى ح ف سػا ت ثشسػا ٣ ؿاذ. RNA اص ا اب ٢ ا سد ظاش اػتخشاج ػ تضcDNA ثب س ؽ افض د د پ ٣ A ا دب ؿذ. ػپغ ت ػي س ؽ RQ-PCR ػ دؾ ث ٥ ب ك ست شفت. وتایج: تب ٤ ح ب داد ٤ ب U6 تشو ٥ جا ٣ اص mirna-16 U6 ثاشا ٢ HuH-7 mirna-16 ثاشا ٢ HepG2 دس ا ٤ ا ؿاشا ٤ ي ت ٥ بس ثشا ٢ ط و تش دس صاد بػت اػت. وتيج گيری: دس د ع ٣ ت ا اص ا ٤ ط ب ٢ و تش دس صاد ث د ٥ ػذ تغ ٥٥ ش ث ٥ ب ؼ ٣ داس پب ٤ ذاس ٢ ث ٥ ب ثا ٥ ا اب ٢ آص ثشا ٢ ػ دؾ ث ٥ ب microrna ب ت ت ت ٥ بس ثب و سو ٥ د ذس ص ٣ دس ا ٤ سد ب ٢ ػ ٣ اػتفبد وشد. کليذياشگان: RQ-PCR microrna ط و تش دس صاد و سو ٥ د ذس ص ٣ ػش ب وجذ مجل عل م پسشکی مدرس: آسیب شىاسی زیستی دير 18 شمار 1 ب ار 1314 صفحات: مقذم وف RNA ب ٢ و چه دس ٤ وبس ٤ ت ب فب ٣ ػظ ٥ ث د و ثب وف ٥ ىش RNA ب mirnas( ٤ ب )mirs مؾ آ ب دس و تش تشخ اص ػب 1993 ؿش ع ث ص ٤ ذ وشد 20 ػب اػت و ادا داسد ؿذت ٤٣ بثذ. mir اب RNA اب ٢ 68 مجل عل م پسشکی مدرس: آسیب شىاسی زیستی دير 18 شمار 1 ب ار :
3 شن کىترل درينزاد در مطالعات بیان mir ا تحت تیمار با ک رک میه غ ٥ ااش وااذ ؿاا ذ و ئ ت ٥ ااذ ٢ سد ٠ خذ ٤ ااذ ٢ اص ى ب ٢ و چه RNA غ ٥ ش وذ و ذ دس صاد اػات وا ث ٥ ب ط سا دس ػ پغ اص س ٤ ؼ ٣ اص ش ٤ ك تدض ٤ mrna ٤ ب بس تشخ ا آ ت ظا ٥ ا ٣ ب ٤ اذ =1 2>. اص ص اب واف RNA ب ٢ و چه غ ٥ ش وذ و اذ lin-4 let-7 )وا ا اش ص ث ػ ا mir ؿ بخت ا ٣ ؿا د( دس وبن بثاذ ٤ ت ٥ غ ا اب غ elegance( )Caenorhabditis 3= <4 تبو كاذ ب تا ا ٣ mir دس دا ػ ٥ ؼ ٣ اص خ دات اص ٥ ب ب تب ا ؼب ؿ بخت ؿذ اػت. ثشا ٢ ط ا ؼاب 1000 ط س اض و اذ mir وا اذ دا ٤ ه دسكذ ط سا ؿب ٣ ؿ د تخ ٥ صد ٣ ؿ د. ث ظش ٣ سػذ ا ٤ mir ب ت ظ ٥ ث ٥ ب ٤ ه ػ ط ا ؼب ٣ سا ثش ػ ذ داؿت ثبؿذ. ش mir تمش ٤ جب 200 س ؿت سا ثا ا س ؼتم ٥ ٤ ب غ ٥ ش ؼتم ٥ ذف لشاس ٣ د ذ ا ٤ دس اب ٣ اػات و ٤ ه ط س ض و ذ پش تئ ٥ ٥ ض ٣ ت ا ذ ثب ث ٥ ؾ اص ٤ ه mir ت ظ ٥ ؿ د =5>. مؾ و ٥ ذ ٢ mir ب ث ػ ا ت ظ ٥ و ذ اب ٢ فشآ ٤ اذ ااب ٢ خت ااف ػاا ٣ ظ ٥ ااش ص ااب ث ااذ ٢ تىاا ٣ ٤ Timing( )Developmental ت اب ٤ ض ثابفت ٣ تىث ٥ اش ػاا ٣ تى ٤ ا ذا تذا ت ا ب ٣٤ ػ ث ٥ بد ٢ )ص ب ث اذ ٢ تىا ٤ : )Developmental Timing شي ػ ٣ ثش ب س ٤ اض ٢ ؿاذ )Metastasis( ت س صا ٣٤ ت بخ تبػاتبص )Apoptsis( سيصا ٣٤ ث اثجبت سػ ٥ ذ اػت =4 6>. ث ٥ ب بثا خاب ٢ mir اب ث د ٥ تغ ٥٥ شات ط ت ٥ ه اپ ٣ ط ت ٥ ه مق دس بؿ ٥ پاشداصؽ آ ب دس ثؼ ٥ بس ٢ اص ػش ب ب ٢ ا ؼب ٣ ضاسؽ ؿاذ اػات ؿ ا ذ ؼتذ ٣ دس ا ٤ ص ٥ ج ٣ ثاش ماؾ و ٥ اذ ٢ mir اب ث ػ ا ط ػش ب صا ٤ ب ػشو ة ش ت س دس ت ػؼ ثؼ ٥ بس ٢ اص ثذخ ٣ ٥ ب ٢ ا ؼب ٣ خا د داسد =9-7>. ا ٤ ا ىا اب دس ػش ب صا ٣٤ وجذ و اص ػش ب ب ٢ ثب تخ ٥ ق هؼ ٥ ف مب ث دس ب اػت =10> مؾ لبث ت خ ٣ ثبص ٢ ٣ و ذ =11-18>. ث د ٥ ػذ پبػخ ث دس ب بػت دس ػش ب وجذ اػتفبد اص س ؽ ب ٢ دس ب ٣ خذ ٤ ذ ٣ ت ا ذ ا ٥ ات داؿات ثبؿاذ. اص س ؽ ب ٢ دس ب ٣ اب ابهش سد ت خ ٣ ت ا ث اػتفبد اص تشو ٥ جبت غزا ٣٤ ػ ت ٣ ص ٤ ؼتفؼب ؼتخشج اص ٥ ب ب تشو ٥ ت آ ب ثاب س ؽ اب ٢ ا ٤ دس اب ٣ اؿابس واشد. و سوا ٥ Curcuma ( ؼتخشج اص ٥ ب و سو ب اب )Curcumin( )Longa ٤ ى ٣ اص ا ٤ تشو ٥ جبت اػت و ثب اػتفبد اص ب اب ب فبنك آ ذ ثش ى ا ٥ ت هؼف آ دس س د ث ػ ٣ ت ا ذ ا تخبة بػاج ٣ دس دس اب ػاش ب اب ٢ ماب ثا دس ب ب ٢ خ د ثبؿذ. ب س و ػاش ب ٤ اه ث ٥ ابس ٢ چ ذػب ٣ اػت ثاشا ٢ دس اب آ ثا تشو ٥ جابت ٣ وا ت ا اب ٣٤ ذف ٥ ش ٢ اخضا ٢ تؼذد دس ػ ٣ سا داسد ٥ بص ذ ٤. اغ ت تشو ٥ جبت ؿ ٣ ٥ دس ب ٣ اب ابهش ٤ ه ذف دس ػ ٣ داسد ا ٤ دس اب ٣ اػت و آغبص پ ٥ ش ٢ ػش ب ثاب اخات دس كذ ب ط ؼ ٥ ش ب ٢ پ ٥ ب سػب ٣ شا اػت و ب د اذ ٠ ٥ بص جش ث داس ب ٣٤ ثب چ ذ ٤ ذف ثشا ٢ غ جا ثاش ػاش ب اػت. اص آ خب ٣٤ و و سو ٥ ت ا ب ٣٤ ت ظ ٥ ؼ ٥ ش ب ٢ دس ػاا ٣ خت فاا ٣ سا داسد ا تخاابة بػااج ٣ ثااشا ٢ دس ااب پ ٥ ؾ ٥ ش ٢ اص ػش ب اػت. تشو ٥ ات و سوا ٥ ب اب ا د ذس ص ٣ ث ب و سو ٥ د ذس ص ٣ ٤ اب اب و سو ٥ ثشاػبع ب ؼبت ا داب ؿاذ ت ػاي مماب ابهاش آثابس ؼ ٣ داس ٢ دس بس ػش ب ث ك ست دس ثذ vivo( )in دس ا ٥ ي آص ب ٤ ا ب ٣ vitro( )in اب داد اػات =28-19>. ث بثشا ٤ ت م ٥ مبت ث ٥ تش ثشا ٢ س ؿ ػبص ٢ شچ ث ٥ اتش تایث ٥ ش ب و سو ٥ دس ؼ ٥ ش ب ٢ تؼذد ػ ٣ ٣ ت ا ذ پ ٥ جشد ٢ دس ساػتب ٢ اػتفبد ٠ ثب ٣ ٥ ا ٤ تشو ٥ ت ثبؿذ. تب ث اب ت م ٥ م ٣ ج ٣ ثش تؼ ٥٥ و تش دس صاد بػت دس ػا اب ٢ ػاش ب وجاذ ك ست شفت اػت چ ٥ ثشسػ ٣ استجبى ب و سو ٥ ب ١٤ ث ٥ ب mir دس ػش ب وجذ ب ؼ ذ اػات. تؼ ٥ ا ٥ ط و تش دس صاد بػت مذ ا ٢ ثش چ ٥ ب ؼا ا ٢ اػات. ثاب ت خ ث ب ؼبت فشا ا دس ص ١ ٥ تؼ ٥ ا ٥ ط و تاش دس صاد ٤ ه و تش دس صاد تشن ثشا ٢ ا اع ثبفت ت ٥ بس ٤ ب ث ٥ بس ٢ ب ؼ ٥ ذ اػت ث بثشا ٤ ثشا ٢ خ ٥ ش ٢ اص سخاذاد خ اب دس ص ١ ٥ و ی ٣ ػبص ٢ داد ب ٢ ث ٥ ب اسص ٤ بث ٣ ط ب ٢ و تش دس صاد وب ذ ٤ ذ ثشا ٢ ش ١ آص ب ٤ ؾ هش س ٢ اػت. د ط و تش داخ ٣ شػاا microrna-16 small nuclear ( snrna-u6 69 Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, Vol. 18 ( ), N0. 1 8;
4 میىا زماوی ي مکاران )RNA دس ب ؼبت ص ٤ بد ٢ ث ػ ا و تش دس صاد اسص ٤ بث ٣ اػتفبد ؿذ اػت =37-29> چ ٥ U6 دس ب ؼ ا ٢ ت ػي ممب ابهش ث ػ ا و تش داخ ا ٣ دس سد ٠ ػا ٣ ٥ اب )Glioma( ت ت ت ٥ بس ثب ب و سو ٥ ثاشا ٢ ثشسػا ٣ ث ٥ اب mir اػتفبد ؿذ اػت =21>. دس ت م ٥ ك ابهش ٥ ض ث ٥ ب ا ٤ د ط دس سد ااب ٢ ػاا ٣ ػااش ب ٣ وجااذ ت اات ت ٥ اابس ثااب اب و سو ٥ ثاشا ٢ ثشسػا ٣ و تاش دس صاد بػات ثاشا ٢ ب ؼابت ػاا دؾ ث ٥ ااب microrna اب ااشتجي ثااب ت ٥ اابس ب و سو ٥ دس ػش ب وجذ اسص ٤ بث ٣ ؿذ. م اد ي ريش ا ساخت حامل دوذريزيمی د ذس ص ب ) ٥ ؼ ب ٢ پ ٥ ؿاذ اتك اص اااذ ب ٢ اػ ٥ ذ چشة ا ئ ٥ هاػ ٥ ذ اػت( ثشا ٢ ا ٥ ثبس دس ا ٤ شا ت ػي ش ت م ٥ مبت ٣ ابهش شاا ٣ ػابخت ؿاذ اػات. ا ٠ آ بد ػبص ٢ ب و سو ٥ د ذس ص ٣ دس ب ؼ ب ٢ لج ٣ ا ٤ ممب ت ه ٥ داد ؿذ اػت =20 21>. کطت سل ل دس ت م ٥ ك ابهش اص سد ب ٢ ػا ٣ HuH-7 HepG2 پبت ب )خش ٤ ذاس ٢ ؿذ اص ثب ه ػ ٣ ا ؼت ٥ ت پبػت س ا ٤ اشا ( اػتفبد ؿذ. ػ ب دس ٥ ي وت Dulbecco's ( DMEM )Modified Eagle's Medium اب ٢ 10 دسكذ ػش خ ا ٥ ب ٢ 1 دسكاذ آ تا ٣ ث ٥ ت ٥ اه پ ا ٣ ػا ٥ ٥ -اػتشپت ب ٤ ؼا ٥ Penicillin( )Streptomycin- دس ؿاااشا ٤ ي ا ى ثبػااا 37 ٥ دسخ ػب ت ٣ شاد 5 دسكذ سؿذ داد ؿذ ذ. ػ ب پاغ اص زؿت 3 س ص ثب اػتفبد اص تش ٤ پؼ ٥ )Trypsin( 0/25 دسكذ 0/02 دسكاذ )Ethylenediaminetetraacetic acid( EDTA پبػبط داد ؿذ ذ. ت ب ٣ اد وت ػا اص ؿاشوت Gibco آ ش ٤ ىب خش ٤ ذاس ٢ ؿذ. مطا ذ ک رک ميه داخل سل ل با ميكريسك پ فل رسىت ثشا ٢ تی ٥٤ ذ خزة و سو ٥ دس داخ ػ ا ٣ تا ا اص خبك ٥ ت ف سػب ؼ ٣ رات ٣ ى و سو ٥ ث ػ ا ؿ بػا اػتفبد وشد. ثذ ٤ ظ س ػ ب دس پ ٥ ت وت داد ٣ ؿ ذ ػپغ ث ذت 4 ػبػت ثب غ ظت ٥ ىش الس 15 ب و سو ٥ د ااذس ص ٣ ت ٥ اابس ؿااذ ذ ػااپغ اا ٥ ي واات اااب ٢ ب و سو ٥ خبسج ؿذ ثؼذ اص ؿؼت ٢ ػ ب ثب ثابفش فؼاافبت ػااب ٥ PBS( )Phosphate Buffered Saline: ػىؼجشداس ٢ ثب ٥ ىش ػى ح آزم ن MTT ف سػ ت اص ػ ب ا دب شفت. ث ظ س ػ دؾ ٥ ضا ػ ٥ ت ٤ ه تشو ٥ ت ؿ ٥ ٥ ب ٣٤ ٤ ب اش بد د ٤ ش س ٢ ػ اص آص =3-)4 MTT 5 -د ٢ ت ٥ ا تتشاص 2-)2-٥ 5- د ٢ ف ٥ تتشاص ٥ ا ثش ب ٤ اذ( اػاتفبد ٣ ؿ د. ؼشفMTT و ٤ ه ه تتشاص ٥ صسد س اػت خزة ٥ ت و ذس ٢ ػ ب ٢ ثب تبث ٥ ه فؼب ٣ ؿ د دس اثش فؼب ٥ ات آ اض ٤ ااب ٢ د ٥ اذس ط بص ت ٥ ااذ ث ا س ف س اابص )Formazan( ثب س ث فؾ ٣ و ذ و دس ا بػت اا ٥ ضا س ت ٥ اذ ؿاذ ثاب اػاپىتش فت تش ٢ ا اذاص ٥ اش ٢ ٣ ؿ د. ثشا ٢ ش ع ػ ٣ ثب ٤ ذ ثب سػ ٣ ساث ت بػج ٣ اص تؼذاد ػ س ت ٥ ذ ؿذ سا ثا دػات آ سد. ثا ا س ختلش اذ د 8000 ػ دس ش چب ه پ ٥ ت 96 خب وت 24 ػبػت ثؼذ ثب غ ظات اب ٢ ؼ ٥ ا ٣ اص اب و سو ٥ ب اب )د ذس ص ( ت ٥ بس داد ؿذ ذ. ثؼذ اص ص ب سد ظش )24 ػبػت ت ٥ بس( ثاشا ٢ ت ٥ ابس ا ٥ ي اش چب اه ثاب 200 ٥ ىش ٥ تش ٥ ي MTT وت تبص تؼ ٤ ن ؿذ ذ پ ٥ ت ب دس ا ى ثبت س 37 دسخ ػاب ت ٣ اشاد 5 CO 2 دسكاذ ث ذت 4 ػبػت ا ى ث ؿاذ. ػاپغ ٥ ىش ٥ تاش 200 DMSO Sulfoxide( )Dimethyl ثؼذ اص تخ ٥ ا ١ MTT ثا شچب اه پ ٥ ت افض د ؿذ ص ٤ ؼت ب ب ٣٤ ؼج ٣ ػ دس ج مجل عل م پسشکی مدرس: آسیب شىاسی زیستی دير 18 شمار 1 ب ار
5 ت ٥ ا شن کىترل درينزاد در مطالعات بیان mir ا تحت تیمار با ک رک میه ب تش ت ػي كف خا ا پ 96 خب ا ( plate 96well TECAN( )reader ػ ن ٥ غ( تؼ ٥٥ ؿاذ. ؼاجت خازة دس ػ ب ٢ ش ت ٥ بس ث ش و تش ٥ ضا ثمب ٢ ػ اب ٤ اب ص ٤ ؼت ب ب ٣٤ آ ب دس ش غ ظت سا ب خ ا ذ داد. غ ظت ٣ و دس آ 50 دسكذ اص ػ ب ت ػي ب و سو ٥ وت ؿذ ذ ت ت ػ ا غ ظت و ذ دس ظش شفت ؿذ. داد ب ٢ ابك اص 3 آص ب ٤ ؾ دضا ث كا ست ٥ اب ٥ ± ا اشاف اػاتب ذاسد )خه ؿذ وب سػ ة ا ٥ ت آ سا وب ؾ ٣ د ذ( دس ب ٤ ت سػ ة دس آة ت ٥ بس ؿذ ثب DEPC ا ؿذ ب دس د ب ٢ 60 دسخ ث ذت 10 دل ٥ م ا ى ث ؿذ. ثشا ٢ ب ذ بس ٢ افظ RNA ا تمب ذاس ٢ ب دس فش ٤ ضس 80- دسخ ػب ت ٣ شاد ك ست شفت. و ٥ شاا دس ص ٤ ش د ؿا ٥ ٥ ب ٣٤ ا دب شفت ث ظ س ثا ااذال سػاب ذ فؼب ٥ ات آ اض ٤ RNase و ٥ ب س ٢ ٤ خ ذاس ٢ خبث خب ٣٤ ا اد س ٢ ٤ خ ا دب ؿذ. SD( )Mean ± اسا ٤ ؿذ. ف ٥ استخراج RNA تام سل لی ٥ ض ػ ب ثب او ؾ ش Invitrogene( TRIzol آ ش ٤ ىب( ك ست شفت. شاا اػتخشاج RNA جك س ؽ وبس ؿشوت ػبص ذ ا دب ؿذ. ث س ختلش اثتذا ٥ ض وب ػا اب ثاب TRIzol دس د ب ٢ اتبق ث ذت 10-5 دل ٥ م ا دب ؿذ. ثؼاذ اص افض د ٥ ىش ٥ تش 200 و ش فش ػبص ٢ خ ى ثب ػاش ت وشد ؿذ ٤ ذ ث ذت 15 ثب ٥ ك ست شفت. ٥ ىش ت ٥ ة دس د س 12000g دس د ب ٢ 4 دسخ ػب ت ٣ شاد ػب تش ٤ ف ط ؿاذ. دس اثش ػب تش ٤ ف ط ػ ال ٤ ا ٤ دبد ٣ ؿا د. RNA دس ال ٤ ا ثابال ٣٤ پش تئ ٥ دس ال ٤ ٥ ب ٣ DNA دس ال ٤ پب ٣ ٥٤ او س داسد. ث ٥ د ٥ ثشا ٢ خ ٥ ش ٢ اص آ ا د ٣ ثاب پاش تئ ٥ DNA اذ د 90 دسكذ ال ٤ ثبال ٣٤ ث آسا ٣ ث ت ٥ ة خذ ٤ ذ تم ؿذ. ا ٤ ض پش پب )Isopropanol( ث ا ذاص ٠ اد ب ٤ غ ا تمب ٤ بفت اهبف ؿذ ث آسا ٣ خ ى ؿذ ث ذت 20 دل ٥ م دس فش ٤ ضس 20- ا ى ث ؿذ. دس د س 12000gدس د ب ٢ 4 دسخ ػب ت ٣ شاد ث ذت 15 دل ٥ م ػب تش ٤ ف ط ؿذ. ال ٤ س ٣٤ تخ ١٥ ٥ ٣ ٥ تش 1 اتب 75 دسكذ )ت ٥ ؿذ ثاب آة ت ٥ ابس ؿاذ ثاب )Diethylpyrocarbonate( DEPC افاض د ؿااذ ستىااغ )Vortex( خ اا ى تااب و ااذ ؿااذ سػاا ة تاا ٥ ىش ت ٥ ة ا دب ؿذ. دس د س 7800g دسد ب ٢ 4 دسخ ػب ت ٣ شاد ث ذت 8 دل ٥ م ػب تش ٤ ف ط س ٣٤ ثب اس وشد ت ٥ ة س ٢ دػت ب وبغز ٢ تخ ٥ ؿذ. ػاپغ سػا ة ث س ؼج ٣ دس د ب ٢ اتبق ث ذت چ اذ دل ٥ ما خاه ؿاذ. بررسی کم ی ي کيفی RNA استخراج ضذ پغ اص اػتخشاج RNA و ٥ ت و ٥ ف ٥ ت آ ثاب س ؽ اب ٢ ػ د ٣ س ٢ ا ىتش ف سص ط آ بسص ثشسػ ٣ ؿذ. ثشسػ ٣ غ ظت RNA ثب س ؽ اػپىتش فت تش ٢ ٤ ه س ؽ و ی ٣ اػت ٣ ت ا غ ظت خ ف RNA آ د ٣ آ ثب پش تئ ٥ تشو ٥ جبت ف ا ٣ سا ثاب اػاتفبد اص خازة ا س ٢ دس ا ج ب 260٢ )ثشا ٢ خزة اػ ٥ ذ و ئ ٥ ه( 280 )ثشا ٢ خزة پش تئ ٥ ( 230 )ثشا ٢ خزة ف ( ب تش ثشسػ ٣ وشد. ٣٤RNA و اص ظش ؿ ٥ ٥ ب ٣٤ دػت خ سد ثبؿذ اص ظش ص ٤ ؼت ٣ و ٥ ف ٥ ت اػتب ذاسد داؿت ثبؿذ ا ٢ ثب ذ ٤ ظ ا ٢ س ٢ ط آ بسص ب ٣ د ذ. او س ثب ذ ب ٢ RNA س ٤ جا ص ٣ 28s 18s ب د ذ ٠ ػب دػت خ سد ث د RNA اػت. ب ٣٤ ثب و ٥ ف ٥ ت ػب ٣ اذال اػ ٥ ش )Smear( سا دس ثبال ث ٥ پب ٥٤ ثب ذ ب ٢ زو س ب ٣ د ذ ؿذت ثب ذ 28s تمش ٤ جب د ثشاثش ثب ذ 18s اػت. فمذا ثب ذ ب ٢ اه 18s س ٤ ج ص ٣ RNA 28s ب د ذ ٠ تدض ١٤ RNA ت ػي آ ض ٤ RNase اػت ث خل ف ا ش اب ت اػ ٥ ش ذ د ث ثخؾ ت تب ٣ ط ثبؿذ. ياکىص ريو یسی معك س برای ساخت cdna برای شن ای microrna ثشا ٢ تجذ ٤ RNA ث )Complementary DNA( cdna ٥ بص ث آغبص ش )Primer( ثشا ٢ خفت ؿذ ثاب RNA اػات 71 Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, Vol. 18 ( ), N
6 میىا زماوی ي مکاران ت ػي آ ض ٤ س ؿت ثشداس ؼى ع Transcriptase( )Reverse ا ٤ دبد شدد. آغبص ش ٢ وا ثاشا ٢ ػا تض ا ا ٥ سؿات cdna اػتفبد ٣ ؿ د ٣ ت ا ذ ث س اختلبك ٣ ث سد ذف تل ؿ د ٤ ب ث RNA ب تل ؿ د. RNA اػتخشاج ؿاذ ثاب اػتفبد اص TRIzol ث ػ ت اات ب آ ا د ٣ ثاب DNA ا ت اات ت ٥ اابس ثااب Thermo Fisher Scientific( DNaseI آ ش ٤ ىب( لشاس شفت. ثشا ٢ ػبخت cdna دس ا ٤ ا ت م ٥ اك اص و ٥ ت اػتفبد ؿذ. ثب ٤ ذ ت خ ؿ د و و ٥ شاا ثب ٤ ذ ثب ػب ٤ ب ٢ ػبس ٢ اص RNase ا داب ؿا د. ثاشا ٢ ػابخت cdna اص و ٥ ات PARSGENOME MiR-Amp kit اػاتفبد ؿذ. تىث ٥ ش microrna ث و ه ٤ ى ٣ Real-time PCR اص پاش وبسثشدتش ٤ س ؽ ب دس ا ص ت م ٥ مابت ٣ microrna اػات. اػبع ا ٤ س ؽ بث س ؽ اب ٢ ؼ ا ٣ Real-time PCR اػاات ثااب ا ٤ اا تفااب ت واا ثاا اػاا واا چى ٣ ا ااذاص microrna ب سا وبس ب ٢ خبك ٣ ثشا ٢ ا ٤ ظ س اسا ٤ ؿاذ اػت. افض د ٤ ه د polya ث mir ب ٢ سد ظاش ٤ ىا ٣ اص ا ٤ ؿ ٥ بػت و دس و ٥ ات PARS GENOME MiR-Amp kit )ا ٤ شا ( ٥ ض اص ٥ س ؽ ثشا ٢ تىث ٥ ش mir ب اػتفبد ؿاذ اػت. شا افض د پ ٣ A ؿب : ثبفشآ ض ٤ پ ا ٣ A پ ٥ اشاص A ٥ ىش ٥ تااش( آ ااض ٤ پ اا ٣ 2( ATP 2( ٥ ىش ٥ تااش( 10X پ ٥ شاص )2-1/5 RNA ٥ ىش ش ( دس ب ٤ ات سػاب ذ ثا اد و ٣ ٥ ىش ٥ تش 20 ت ػي آة ػابس ٢ اص RNase اػات. ت ب ٣ اد ف ق ثب و ه پ ٥ پت وشد ث آسا ٣ ثب ٤ ىذ ٤ ش خ ى ثؼذ اص چشخب ذ ت ات تشو ٥ جابت دس د اب ٢ 37 دسخا 5x ػب ت ٣ شاد ث ذت 10 دل ٥ م ا ى ث ٣ ؿ د. ل ف ق لبث ذاس ٢ دس فش ٤ ضس 80- دسخ ػب ت ٣ شاد ث ذت اذاوثش 6 ب اػت. شا ١ ػبخت سؿت ا cdna ؿب : ت ٥ ثبفش او ؾ )2 ٥ ىش ٥ تش( خ ى )10 dntp ٣ ٥ الس ٥ ىش ٥ تش( 1 آ ااض ٤ )0/5 RT ٥ ىش ٥ تااش( آغبص ش ااب ٢ ػاا تض )10 mir پ ٥ ى الس شوذا ٥ ىش ٥ تش( 1 RNA اب ٢ پ ٣ A اص شا لج )500 ب ش ( دس ب ٤ ت سػب ذ ثا ادا و ا ٣ 10 ٥ ىش ٥ تش ت ػي آة ػبس ٢ اص RNase ث د. و ت ب ٣ اد ف ق ثب و ه پ ٥ پت وشد ث آسا ٣ ثب ٤ ىذ ٤ ش خ ى ؿذ دس ب ٤ ت اػپ ٥ ؿذ دس د ب ٢ دسخ ػب ت ٣ شاد ث اذت 60 دل ٥ م ا ى ث ؿذ ػپغ ثشا ٢ غ ٥ شفؼب ػبص ٢ آ ض ٤ RT ث ذت 10 دل ٥ م ا ى ثبػ ٥ دس د ب ٢ 70 دسخ ػب ت ٣ شاد الص اػت. ل ف ق دس فش ٤ ضس 20- دسخ ػب ت ٣ شاد ث ذت اذاوثش 2 ب لبث ذاس ٢ اػت. Reverse Transcription ( ياکىص RT-PCR )PCR پغ اص ػا تض cdna اص اوا ؾ Real time RT-PCR ػ ٥ ؼت )ROX( Eva green ثشا ٢ ػا دؾ و ا ٣ ث ٥ اب ط اب اػاتفبد ؿاذ. ا اد ا سد اػاتفبد ؿااب خ ا ى HOT Solis ( 5X FIREPOL EvaGreen qpcr plus ROX Bio Dyne اػت ٣ ( آغبص ش ب ٢ ؼتم ٥ ؼىا ع ثاشا ٢ ش د mir-16 U6 ث د و اص ؿشوت پبسع ط ت ٥ ؿاذ. Real Time ػا تض ؿاذ ( دػات ب cdna( ا ا DNA Real time RT-PCR ثااشا ٢ اواا ؾ )ABI 7500( PCR اػتفبد ؿذ. ثش ب د ب ٣٤ ص ب ٣ بثك خذ 1 اخشا ؿذ. جذيل 1 ؿشا ٤ ي د ب ٣٤ ص ب ٣ دس ػ دؾPCR Real-time Quantitative شا اػشؿت ٣ ا ٥ اػشؿت ٣ اتلب ؼتشؽ ؼتشؽ ب ٣٤ چشخ 1 د ب )دسخ ػب ت ٣ شاد( 95 ص ب 15 دل ٥ م ثب ٥ 20 ثب ٥ 30 ثب ٥ 5 دل ٥ م تجسی ي تحليل آماری تدض ٤ ت ٥ داد ب ثب اػتفبد اص ش افاضاس GraphPad Prism5 تدض ٤ ت ٥ آ بس ٢ ثاب اػاتفبد اص س ؽ آ اب ٥ ض اس ٤ ب غ ٤ اه شفا ( Varience: One Way Analysis of )ANOVA آص ت ٣ ب ٢ ؼتم Unpaired( )T-test 72 مجل عل م پسشکی مدرس: آسیب شىاسی زیستی دير 18 شمار 1 ب ار
7 ه ٤ ا شن کىترل درينزاد در مطالعات بیان mir ا تحت تیمار با ک رک میه ث ٥ ب ٢ و تش ت ٥ بس ا دب ؿذ. وتایج مطا ذ ک رک ميه داخل سل ل با ميكريسك پ فل رسىت ث ظ س تی ٥٤ ذ خزة و سو ٥ داخ ػ س د آ ت ػي ٥ ىش ػى ح ف سػب غ ث د ٥ خبكا ٥ ت ف سػاب غ راتا ٣ و سو ٥ ثشسػ ٣ ؿذ. ػ ب ٢ ػش ب ٣ ثب غ ظت ٥ ىش الس 14 ث ذت 3 ػبػت ت ٥ بس ؿذ ذ ػپغ اص آ ب ػىؼجشداس ٢ ؿذ. بررسی غلظت مىاسب تيمار سل ل ای سرطاوی با واو ک رک ميه )ک رک ميه دوذريزيمی( آص MTT ا دب ؿذ داس ابك اص آ دس ؿى 2 لبث ب ذ اػت. تدض ٤ ت ٥ داد ب ثاب ANOVA شف اثش ؼ ٣ داس ػ ٥ ت ب و سو ٥ )0/0001>P( ػاذ ػ ٥ ت د ذس ص س ٢ ا ٤ سد ب ٢ ػ ٣ دس ت ٥ بس 24 ػبػت دس ثبص ٠ غ ظت 0 تب ٥ ىش الس 30 س ٢ ش د سد ٠ ػ ٣ سا ب داد. ماذاس IC 50 ثاشا ٢ اب و سو ٥ دس ػا اب ٢ ػش ب ٣ پبت ب اذ د ٥ ىش الس 24 ث دػت آ ذ. ػپغ ثشا ٢ ت ٥ بس غ ظت ٣ ؼبد IC 50 اػتفبد ؿذ. ضكل 1 ب ذ خزة ػ ٣ و سو ٥ ثب ٥ ىش ػى ح تلب ٤ ش اص د سد ٠ ػ ٣ پبت ب )ا ف( )1( تل ٤ ش و تش )2( تل ٤ ش ٥ ىش ػى ح س ٢ اص ػ ب ٢ HepG2 )3( تل ٤ ش ٥ ىش ػى ح فشاث فؾ اص ػ ب ٢ HepG2 )ة( )1( تل ٤ ش و تش )2( تل ٤ ش ٥ ىش ػى ح س ٢ اص ػ ب ٢ HuH-7 )3( تل ٤ ش ٥ ىش ػى ح فشاث فؾ اص ػ ب ٢ HuH-7 اػت. تلب ٤ ش ب ش س د و سو ٥ ث ػ بػت مذاس و ٣ اص آ ث ك ست وش ٤ ؼتب ث ٥ ػ ب ب ذ ٣ ؿ د. )ثضس ب ٣٤ 100( ضكل 2 ثشسػ ٣ اثش ػ ٥ ت ب و سو ٥ د ذس ص )ا ف( سد ٠ ػ ٣ HepG2 )ة( سد ػ ٣ HuH-7 دس ا ٤ ا ثابص ٠ غ ظات اب وش و ٥ ثا ا س ؼ ا ٣ داس ٢ : 0/05>P : ( ػ ب ٢ ػش ب ٣ پبت ب سا وب ؾ ٣ د ذ ٣ د ذس ص اثش ػا ٥ ت ؼ ا ٣ داس ٢ س ٢ ػا اب اذاسد. )Viability( ص ٤ ؼت ب ب ٣٤ )0/0001>P( )P<0/0001 : P<0/001 : P<0/01 73 Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, Vol. 18 ( ), N
8 میىا زماوی ي مکاران استخراج RNA از سل ل اای تيمارضاذ باا واو ک رک ميه ي سل ل ای کىترل برای بررسی بيان شن ا ػ اب دس پ ٥ ات اب ٢ 6 خب ا ثاب غ ظات بػاج ٣ اص ب و سو ٥ ت ٥ بس ؿذ ذ ثؼذ اص ص ب سد ظش ثب اػتفبد اص تش ٤ ض RNA اص ػ ب ٢ و تش ت ٥ بس اػتخشاج ؿذ. ثشا ٢ ثشسػ ٣ دسػت ٣ RNA اػتخشاج ؿذ خ د ثب ذ ب ٢ 18s 28s 5s س ٢ ط آ بسص ثشسػ ٣ ؿاذ وا اب د اذ دسػات ٣ RNA ب ٢ اػتخشاج ؿذ ثا د اش ا ت ػاي دػات ب اػپىتش فت تش دس ا ج اب ٢ اب تش ا ذاص ٥ ش ٢ ؿذ ؼجت ب ٢ 260/ /280 ث ٥ 2-1/8 ث د و ب د ذ ٠ ػذ آ د ٣ ب ٢ پاش تئ ٥ ف ا اػات چ ٥ خزة دس ج 260 ب تش ب د ذ ٠ غ ظت RNA سد ظش اػت. ث بثشا ٤ تب ٤ ح ث دػت آ ذ ب د ذ آ ث د و ٢RNA اػتخشاج ؿذ ٣ ت ا ذ ثب ا ٥ اب ثابال دس شاا ثؼذ ٢ ت م ٥ ك اػتفبد ؿ د. تجسی ي تحليل بيان ي hsa-mir-16 snrna- U6 در سل ل ای تيمار ضذ با واو ک رک ميه ي سل ل ای کىترل چشخ اذ آػتب ١ ث ٥ ب ط ب ٢ mir-16 U6 دس اش د سد ٠ ػ ٣ دس ب ٢ و تش ت ٥ بس ثب اب و سو ٥ دس خذا 3 2 خق ؿذ اػت. ٥ ب ٥ ثا اشا ا اشاف ؼ ٥ بس ثشا ٢ ت ب اسد چشخ ب ٢ اذ آػتب ١ ط ب دس ب ٢ و تش ت ٥ بس ثب ب و سو ٥ دس تىشاس ب ٢ تى ٥ ى ٣ ص ٤ ؼت ٣ دس خذ 4 لبث ب ذ اػت. تب ٤ ح ب ٣ د ذ تغ ٥٥ شات U6 دس سد ٠ ػاا ٣ HuH-7 mir-16 دس سد ٠ ػاا ٣ HepG2 تغ ٥٥ شات و تش پب ٤ ذاس ٢ ث ٥ تش ٢ داسد. ا جت دس ش د سد ٠ ػ ٣ U6 ث ٥ ب ثبالتش ٢ ؼجت ث mir-16 داسد و ا ٤ اخت ف ث ٥ ب دس سد ٠ ػ ٣ HuH-7 ؼ عتشاػت. جذيل 2 چشخ اذ آػتب ١ دس سد ٠ ػ ٣ HuH-7 mir-16 ث ٥ ب ط ب ٢ U6 )Cycle threshold: Ct( * * تكرار تكىيكی تكرار زیستی Ct Ct شن وم و تىشاس ص ٤ ؼت ٣ تىشاس تى ٥ ى ٣ 19/9932 و تش MiR-16 16/ /5618 ت ٥ بس MiR-16 16/53391 تىشاس تى ٥ ى ٣ 18/1833 و تش MiR-16 18/ /5090 ت ٥ بس MiR-16 19/32912 تىشاس ص ٤ ؼت ٣ تىشاس تى ٥ ى ٣ 14/ /8004 و تش U6 15/ /9121 ت ٥ بس U6 تىشاس تى ٥ ى ٣ 14/ /2747 و تش U6 15/ /7103 ت ٥ بس U6 تىشاس تى ٥ ى ٣ : ظ س اص ا ٤ تىشاس تىشاس شاا تى ٥ ى ٣ آص ب ٤ ؾ اػت ابك Real time PCR ت ب ٤ ض اص ب ٢ ٤ ىؼب اػت. تىشاس ص ٤ ؼت ٣ : ظ س اص ا ٤ تىشاس تىشاس شاا ت ٥ بس ػ ٣ ب ٢ خت ف ثشا ٢ Real time PCR اػت. جذيل 3 چشخ اذ آػتب ١ ث ٥ ب ط ب ٢ mir-16 U6 دس سد ٠ ػ ٣ HepG * * تكرار تكىيكی تكرار زیستی Ct Ct شن وم و تىشاس ص ٤ ؼت ٣ تىشاس تى ٥ ى ٣ 18/7319 و تش MiR-16 19/ /8995 ت ٥ بس MiR-16 18/6603 تىشاس تى ٥ ى ٣ 18/6931 و تش MiR-16 18/ /8860 ت ٥ بس MiR-16 18/8624 تىشاس ص ٤ ؼت ٣ تىشاس تى ٥ ى ٣ 15/ /9190 و تش U6 15/ /9603 ت ٥ بس U6 تىشاس تى ٥ ى ٣ 16/ /4028 و تش U6 16/ /7785 ت ٥ بس U6 تىشاس تى ٥ ى ٣ : ظ س اص ا ٤ تىشاس تىشاس شاا تى ٥ ى ٣ آص ب ٤ ؾ اػت ابك Real time PCR ت ب ٤ ض اص ب ٢ ٤ ىؼب اػت. تىشاس ص ٤ ؼت ٣ : ظ س اص ا ٤ تىشاس تىشاس شاا ت ٥ بس ػ ٣ ب ٢ خت ف ثشا ٢ Real time PCR اػت. مجل عل م پسشکی مدرس: آسیب شىاسی زیستی دير 18 شمار 1 ب ار 1314
9 جذيل ٥ ب ٥ 4 اس ٤ ب غ تغ ٥٥ شات ث ٥ ب ط ب ٢ mir-16 U6 شن کىترل درينزاد در مطالعات بیان mir ا تحت تیمار با ک رک میه MiR-16 & U6 16/46028 ± 0/ /75948 ± 0/ /71729 ± 0/ /97338 ± 0/ MiR-16 18/30989 ± 1/ /48346 ± 1/ /09718 ± 18/ / ± 18/764 U6 14/61068 ± 0/ /03555 ±0/ / ± 16/ /18275 ± 0/ ردة سل لی و تش (HuH-7) ت ٥ بس (HuH-7) و تش (HepG2) ت ٥ بس (HepG2) ضكل 3 ٣ تىث ٥ ش ط ب ٢ ػ ٣ HuH-7 )ج( ث ٥ ب ش ٣ ب ٢ تىث ٥ ش ط U6 )د( ث ٥ ب ش ٣ ب ٢ تىث ٥ ش ط mir-16 U6 دس سد ب ٢ ػ ٣ پبت ب )ا ف( ث ٥ ب ش ٣ ب ٢ تىث ٥ ش ط mir-16 )ة( ث ٥ ب ش ٣ ب ٢ تىث ٥ اش ط U6 دس سد ٠ mir-16 دس سد ٠ ػ ٣ HepG2 اػت. 75 Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, Vol. 18 ( ), N
10 میىا زماوی ي مکاران اػت دس الغ ٣ ت ا فات وا U6 دس ؿاشا ٤ ي ت ٥ ابس ثاب ااب و سو ٥ دس ػاا ااب ٢ HuH-7 پب ٤ ااذاستش اػاات ٣ ت ا ذ ث ػ ا ا ٤ اه و تاش دس صاد بػات دس د ػا آص اا ااشتجي ثاا واابس س د چ اا ٥ mir-16 دس ؿااشا ٤ ي ت ٥ ابس ثاب اب و سو ٥ دس ػا اب ٢ HepG2 پب ٤ ااذاستش اػت ٣ ت ا اذ ثا ػ ا ا ٤ اه و تاش دس صاد بػات دس د ػ آص شتجي ث وبس س د. ث ٥ ااب ط ااب ٢ mir-16 snrna-u6 دس اا ااب ٢ ت ٥ بس و تش ب س و دس ؿاى 5 ا اخق ؿاذ اػت تفب ت ؼ ا ٣ داس ٢ ذاس اذ دس ا ١ ا اسد 0/05>P اػت. ا جتا ثاب ت خا ثا ا ٣ اب ٢ تىث ٥ اش دس ؿاى 4 داس ؿاى 6 ا ٣ ث ٥ ا ٥ دا ا ١ تغ ٥٥ اشات ثاشا ٢ U6 دس ثا ٥ اب ٢ و تاش ت ٥ ابس HuH-7 دا ا ١ تغ ٥٥ اشات ثاشا ٢ mir-16 دس ثا ٥ ا اب ٢ و تاش ت ٥ ابس HepG2 و تاش ضكل 4 تدض ٤ ت ٥ ث ٥ ب ط بU6٢ mir-16 دس سد ب ٢ ػ ٣ پبت ب ثب داس ػت ٣ دس تلب ٤ ش )ا ف( ث ٥ ب U6 )ة( ث ٥ ب mir-16 دس HepG2 )ج( ث ٥ بU6 )د( ث ٥ ب mir-16 دس.HuH-7 ث س تشو ٥ ج ٣ ٥ ب ٣ ٥ اص ث ٥ بU6 mir-16 دس سد ٠ ػ ٣ ) ( HepG2 HuH-7)٢( لبث ب ذ اػت. دس داس ب ٢ ث ٥ ب ط ب ٢ mir-16 U6 ث ٥ ب ٢ و تش ت ٥ بس ؿذ ثب ب و سو ٥ ثب ت خ ث ٥ ب ٥ ا شاف ؼ ٥ بس SD( )Mean ± لبث ب ذ اػت 98 ضكل 5 تدض ٤ ت ٥ ث ٥ ب ط ب ٢ mir-16 U6 دس سد ب ٢ ػ ٣ پبت ب ثب داس خؼج ا ٢ دس تلب ٤ ش )ا ف(دس HepG2 ب ؿب 1: ث ٥ اب U6 دس ا ١ و تش 2: ث ٥ ب U6 دس ١ ت ٥ بس 3: ث ٥ ب mir-16 دس ١ و تش 4: ث ٥ ب mir-16 دس ١ ت ٥ بس ٥ ب ٥ 5: ث ٥ ب mir-16 U6 دس ١ و تش ٥ ب ٥ 6: ث ٥ ب mir-16 U6 دس ١ ت ٥ بس. )ة( دس HuH-7 ب ؿب 1: ث ٥ ب U6 دس ١ و تش 2: ث ٥ ب U6 دس ١ ت ٥ بس 3: ث ٥ ب mir-16 دس ١ و تاش 4: ث ٥ اب mir-16 دس ١ ت ٥ بس ٥ ب ٥ :5 ث ٥ ب mir-16 U6 دس ١ و تش ٥ ب ٥ :6 ث ٥ ب mir-16 U6 دس ١ ت ٥ بس. ث ٥ ب ط ب ٢ mir-16 U6 ث ٥ ب ٢ و تش ت ٥ بس ؿذ ثب ب و سو ٥ ثب ت خ ث اذال اذاوثش تغ ٥٥ شات Max( )Min to لبث ب ذ اػت. مجل عل م پسشکی مدرس: آسیب شىاسی زیستی دير 18 شمار 1 ب ار
11 شن کىترل درينزاد در مطالعات بیان mir ا تحت تیمار با ک رک میه ؿى 6 داس ابك اص تدض ٤ ت ٥ داد ب دس ش افضاس BestKeeper )ا ف( سد ػ ٣ HepG2 )ة( سد ػ ٣ HuH-7 داد ب ٢ Real time PCR ث ك ست Excel تدض ٤ ا ت ٥ ا داد ااب ٢ ااش د ط mir-16 snrna-u6 چ اا ٥ Ct ب ٢ ٥ ب ٥ د ط ت ػي ا ٤ ش افضاس ب ا دب ؿذ. تاب ٤ ح ثشسػ ٣ ت ػي ش افضاس NormFinder ب د ذ ا تخابة ط )0/035 ; Stability Value پب ٤ ااذاس ٢ ٤ ااب )اسصؽ mir-16 ثاشا ٢ سد ػا ٣ HepG2 اػاتفبد تشو ٥ جا ٣ اص اش د ط mir-16 snrna-u6 ثشا ٢ سد ػ ٣ HuH-7 )ثاب اسصؽ اػتفبد ٠ تشو ٥ ج ٣ اص ش د ط ٣ ت ا ذ ث ػ ا ا و تاش دس صاد ا ػبت دل ٥ كتش دس ب ؼ ١ ثشسػ ٣ ث ٥ ب ط ب ٢ mir ث ك ست تشن مب ٤ ؼ ا ٢ دس ش د سد ٠ ػ ٣ اسا ٤ د ذ. ا ٤ ع ث وبس ٥ ش ٢ تشو ٥ ج ٣ ط ب ٢ و تش دس صاد خ ب ٢ ا ٤ دبد ؿذ دس وبسثشد دضا ٢ شوذا سا وب ؾ ٣ د ذ. ب س و دس داس ؿى 6 لبث ب ذ اػات دا ا ١ تغ ٥٥ اشات U6 دس HepG2 دا ١ تغ ٥٥ شات mir-16 دس HuH-7 ثب ثا وابس ٥ ش ٢ ; )0/009 ث د. تشو ٥ ت ا ٤ د ط دس اش د سد ٠ ػا ٣ ؼاجت ثا وابسثشد پب ٤ ذاس ٢ ٤ ب Stability Value دضا ٢ آ ب وب ؾ ٤ بفت اػت. تجسی ي تحليل بيان ي mir-16 در snrna-u6 سل ل ای تيمارضذ با واو ک رک ميه ي سل ل ای کىترل ت سا وارمافسار اای ي BestKeeper.NormFinder اص ش افضاس ب ٢ ا تخبة ط ب ٢ و تاش دس صاد ثشاػابع پب ٤ ذاس ٢ ث ٥ ب آ ب ث ٥ ب ٢ سد آص ب ٤ ؾ ا ٣ تا ا ثا ش افضاس ب ٢ NormFinder BestKeeper اؿبس وشد و دس ب ؼبت فشا ا ٣ ثشا ٢ ا تخبة ط و تش داخ ٣ بػت اص ٥ ب وب ذ ٤ ذ ب ٢ سد ثشسػ ٣ اػتفبد ؿذ اػات. پاغ اص كاذ س تب ٤ ح ثشسػ ٣ داد ب ت ػي ش افضاس BestKeeper ب ش ا تخبة ط mir-16 ) P;0/021 (ثشا ٢ سد ػا ٣ HepG2 تشو ٥ ج ٣ اص ش د ط ثشا ٢ سد ػ ٣ HuH-7 )0/01;P( ث د. تغييرات بيان mir-29a mir-16 U6 تغ ٥٥ شات ث ٥ ب ي ترکيبی از آن ا وسبت ب بياان شن اای ؼجت ث ث ٥ اب ط اب ٢ mir- U6 mir-29a 16 تشو ٥ ج ٣ اص آ ب ب د ذ افضا ٤ ؾ ؼ ا ٣ داس ث ٥ اب ا ٤ ا mir ثااب ػ ىشد ااب ٢ بسو ااذ ٣ ت اا س دس سد ػاا ٣ واب ؾ غ ٥ اش ؼ ا ٣ داس آ دس سد ػا ٣ HepG2 HuH-7 ث د )خذ 5(. خذ 5 تغ ٥٥ شات ث ٥ ب mir-29a ؼجت ث ث ٥ ب ط ب ٢ mir-16 U6 تشو ٥ ج ٣ اص آ ب ردة سل لی ي U6 وسبت ب مياوگيه mir-16 mir-29a وسبت ب mir-16 mir-29a وسبت ب U6 mir-29a 2/5962±0/674 2/4046±0/7126 2/9442±1/2574 HuH-7 0/5843±0/4453 0/4656±0/0337 0/1036±0/4433 HepG2 77 Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, Vol. 18 ( ), N
12 میىا زماوی ي مکاران بحث 9: مجل عل م پسشکی مدرس: آسیب شىاسی زیستی دير 18 شمار 1 ب ار ب ؼبت ثشسػ ٣ ث ٥ ب mir ثب اػتفبد اص time ( RQ-PCR )Real-quantitative PCR ثب ٤ ذ ثب ا تخابة دل ٥ اك ط و تاش دس صاد بػت ثشا ٢ اػاتب ذاسدػابص ٢ داد اب ا داب ؿا د. اػاتب ذاسدػابص ٢ ثاشا ٢ ا ٥ اب اص و یا ٣ ػابص ٢ دل ٥ اك ا ٤ ا ى ب ٢ خزاة و چه ص ٤ ؼت ٣ ك ست ٥ ٣ اشد. اذف اػتب ذاسدػبص ٢ ث اذال سػب ذ اس ٤ ب غ داد بػت و ثشا ٢ ب ٤ ب وشد تغ ٥٥ شات ص ٤ ؼت ٣ ؼ ٣ داس دس و ابس افاضا ٤ ؾ دلات ا ذاص ٥ ش ٢ ث ٥ ب ط ب اػت. اػتفبد اص ثشخ ٣ ط اب ٢ و تاش داخ اا ٣ ثؼاا ٥ بس شػاا اػاات مماا ٥ اص آ ااب ثااشا ٢ اػتب ذاسدػبص ٢ داد ب ٢ ث ٥ ب ط اػتفبد ٣ و ذ. دس اب ٣ وا ثب ت خ ث ا ٤ ىت و ات ٣ ط ب ٢ شػ ب ذ ٤ ب GAPDH β-actin دس ب ٢ خت ف تب 10 ثشاثش ٤ ب ث ٥ تش اخت ف ث ٥ ب داس ذ =19 20> ثشا ٢ ش ب ؼ ث ٥ ٤ ه تب ػ ط ثشا ٢ و تش داخ ٣ ثشا ٢ ش ١ سد آص ب ٤ ؾ ثب ٤ اذ اسص ٤ ابث ٣ ؿا د. دس ب ؼبت تؼذد ٢ snrna ب snorna اب خا د mir اب ث ػ ا ط و تش دس صاد دس ب ؼبت ث ٥ ب ٣ mir ب اػاتفبد ٣ ؿ د. ا ٤ ب ؼبت تاب ثا ا اش ص ؿاب ٤ اب 18S 5S U6 mir-16 ٤ ب LET-7A اػت =33-31>. اخات ف ص ٤ ابد دس ث ٥ اب ط ب ٢ سد ظش ث ٥ ب ٢ سد آص ب ٤ ؾ ٣ ت ا ذ ؼجت ث اػتب ذاسدػبص ٢ هؼ ٥ ف ػبص بس ثبؿذ دس ت ٥ د ١ و ٣ خ ؼ ٣ داس ٢ اسد ؼبصد ا ب دس سد اخت فبت و ا ٤ ا ؼائ ث س ٤ م ٥ ثؼ ٥ بس ؤثش ؼ ٣ داس خ ا ذ ثا د س ٢ ت ٥ دا ١ و ٣ ٣ ت ا ذ تیث ٥ ش ؼى ع ب د ذ. ثب ت خ ث ب ؼ ١ وب ٥ )Calin( و سن )Corce( ت ا ب ٣٤ mir ب دس ت ظ ٥ ا اذاف تؼذد دس ؼ ٥ ش ٤ ىؼب تایث ٥ ش ص ٤ ؼات ٣ آ اب سا چ اذ ٤ ثشاثاش تذ ٤ ذ ٣ و ذ =35>. دس ت ٥ د تغ ٥٥ شات ؼاج ٣ خض ٤ ا ٣ mir اب ا ٥ ت فشا ا ٣ خ ا ذ داؿت. ث ابثشا ٤ اػاتب ذاسدػابص ٢ ث ٥ اب آ ب ثب و تش ب ٢ دس صاد بػت داسا ٢ ا ٥ ت اػات. ٤ اه و تش دس صاد ثشا ٢ ثشخا ٣ آص اب ٤ ؾ اب بػات اػات ا ٣ اػتفبد ث ٥ ؾ اص ٤ ه و تش داخ ٣ ثشا ٢ ػ دؾ ا ػبت شچ دل ٥ كتش تغ ٥٥ شات ث ٥ ب ف ٥ ذ خ ا ذ ث د. ب ؼ ١ ٥ ذ ٢ )Heidi( ىبسا ب داد اػتفبد اص خ د ط ب ٢ mir ؿاب mir- mir mir-17-5p دس ثشسػاااا ٣ ث ٥ ااااب mir دس ثشخ ٣ ثبفت ب ٢ ػش ب ٣ ج ٥ ؼ ٣ ثشا ٢ و تش دس صاد بػت اػت ات ٣ ؼجت ث ط ب ٣٤ ب ذ 5S U6 ؿشا ٤ ي ث تاش ٢ دس ا ٤ اب داس اذ =36>. دس ب ؼا ١ پاب )Pamela( ىاابسا ط ااب ٣٤ اص mir-10b mir-21 mir-16( mir RNU48 RNU19( snrna )let-7 mir-26b Z30( ثشا ٢ و تش دس صاد دس ا اب ٢ ج ٥ ؼا ٣ ت ا س خ ؽخ ٥ ثذخ ٥ ػش ب پؼتب ثشسػ ٣ ؿذ =37>. تب ٤ ح آ ب ااب داد mir-16 Let-7 اص پب ٤ ااذاس ٢ ث ٥ ااتش ٢ دس ثاا ٥ ا اب ثشخ سداسػات. دس ب ؼاا ا ٢ ا اهدس اا ت ىاابسا اػااتفبد ٠ تشو ٥ جاا ٣ اص mir-16 )McDermott( mir-425 ثشا ٢ اػتب ذاسدػابص ٢ داد اب سا پ ٥ ا بد وشد اذ اسص ٤ ابث ٣ آ اب ا ٤ ا تشو ٥ ات سا ث تاش اص اػاتفبد ٠ ثا ت اب ٣٤ اص ٤ ب snrna-u6 mir دس ب ٢ خا ثبفات ت ا س پؼاتب اب داد =38>. ثاب خا د ماؾ بسو اذ ٣ سؿاذ ػ ب ٢ ػش ب ٣ وجذ ثب افضا ٤ ؾ ث ٥ ب mir-16 ا ٤ ط ت ت ت ٥ بس ثب ب و سو ٥ دس سد ب ٢ ػ ٣ ػش ب ٣ وجذ دس ا ٤ ب ؼ تغ ٥٥ ش ث ٥ ب ؼ ٣ داس ٢ ذاؿت. لبث ت خ اػت وا ا ٤ ا ط دس ػ ب ٢ HepG2 ث ٥ ب پب ٤ ذاس ثب ثجبت ث ٥ تش ٢ ؼجت ث U6 ت ت ت ٥ بس ثب ب و سو ٥ داؿت. ا ٤ ؼئ ٣ ت ا ذ ث د ٥ چ ذ ذف ٣ ث د و سو ٥ دس ذف ٥ ش ٢ ى ب ٢ تؼذد دس ؼ ٥ ش مبث ثب ػش ب ثبؿاذ ا ٤ ا ط سا ثا ػ ا ا و تش دس صاد بػات دس د ػا ا سد آص اب ٤ ؾ دس سد ػ ٣ HepG2 دس ؼشم ت خ لشاس د ذ. ثا اش ااب دس استجبى ثب ثشسػ ٣ ط ب ٢ و تش دس صاد ت ت ت ٥ ابس داس ٤ ا ٣ ب ؼبت ص ٤ بد ٢ دس دػتشع ٥ ؼت دس اغ ت پاظ ؾ اب ٢ شثا ى ثا ا ٤ ا ها ع ط اب ٢ شػا ثاذ اسص ٤ ابث ٣ ٤ ظ ا ٣ اب ٢ و تاش دس صاد ثا ػ ا ا ط شخاغ اػاتفبد ؿذ اػت. دس ب ؼ ١ ابهش mir-16 snrna-u6 ث ٥ ب ثابال تغ ٥٥ شات غ ٥ ش ؼ ٣ داس ٢ )0/1>P( سا دس ا ٤ ا د سد ٠ ػا ٣ ت ت ت ٥ بس ثب ب و سو ٥ ب داد. ا جتا مماب ابهاش
13 شن کىترل درينزاد در مطالعات بیان mir ا تحت تیمار با ک رک میه پ ٥ بد ٣ و اذ اػاتفبد ٠ تشو ٥ جا ٣ اص ا ٤ ا د ط ثاشا ٢ و تاش دس صاد ثشا ٢ تدض ٤ ت ٥ ث ٥ ب mir دس سد اب ٢ ػا ٣ ػش ب ٣ وجذ ت ت ت ٥ بس ثب ب و سو ٥ ٣ ت ا ذ ا تخبة بػج ٣ ثبؿذ. دس ثشسػ ٣ دل ٥ كتش ثاب ت خا ثا دا ا ١ تغ ٥٥ اشات چشخ ا ٢ ث ٥ ب ٣ ش د ٢ ا ٤ ط ب دس ؿشا ٤ ي ت ٥ بس ثاب تشو ٥ ات داس ٣٤ سد ظش ثشسػ ٣ ابهش ب و سو ٥ ثشسػ ٣ ب ٢ تغ ٥٥ ااشات چشخاا ااب دس ااش افضاس اااب ٢ Bestkeeper Normfinder داش ثا ت ٥ دا ٥ اش ٢ دل ٥ اكتاش ا تخاابة بػتتش ٢ دس ا ٤ ص ٥ ؿذ و ث س وا ا ٣ تا ا فات ٤ ب اػتفبد تشو ٥ جا ٣ اص ا ٤ ا د ط دس HuH-7 snrna-u6 mir-16 دس HepG2 ت ت ت ٥ بس ؿاشا ٤ ي پب ٤ اذاستش ٢ داسد. دس ك ست اػتفبد اص ش د سد ٠ ػ ٣ دس ٤ ه ب ؼا اػاتفبد ٠ تشو ٥ ج ٣ اص ش د ا ٤ ط ب ثشا ٢ وب ؾ خ ب بػت اػت. ا جت دس ا ٤ ب ؼ ب س و دس تب ٤ ح ب ذ ٣ ؿ د ثشسػا ٣ تغ ٥٥ شات ث ٥ اب mir-29a ؼاجت ثا ط اب ٢ ٤ اب mir-16 U6 تشو ٥ ج ٣ اص آ ب تفب ت ٣ دس ت ٥ د ٥ ش ٢ اص تغ ٥٥ شات ؼج ٣ ث ٥ ب ا ٤ ط ذاؿت. ا ٤ ؼئ ٣ ت ا اذ بؿا ٣ اص اخات ف وا ثا ٥ اب ت ب ٢ خت ف ا ٤ ط ب ث ػ ا ا و تاش دس صاد ثبؿاذ. شچ ب ؼبت ث ٥ تش ثشسػ ٣ ث ٥ ب ٥ ف ػ ٥ ؼ ٣ اص ط اب ٢ snrna اب snorna اب mir اب ٢ د ٤ اش ت ات ت ٥ ابس ب و سو ٥ تب ٤ ح دل ٥ كتش ٢ سا دس پ ٣ خ ا ذ داؿت. تب ٤ ح ا ٤ ت م ٥ ك ٣ ت ا ذ پب ١٤ ب ؼبت شتجي ثب اثش ب و سو ٥ س ٢ ث ٥ ب ط بmiR٢ دس ػش ب وجذ لشاس ٥ شد. تىش لذسدا ٣ ت م ٥ اك ابهاش ثخا ٣ اص پب ٤ اب ب ا وبسؿ بػا ٣ اسؿاذ دا اد ٣٤ ل ة ش ط ت ٥ ه دا ىذ ػ ص ٤ ؼت ٣ دا ب تشث ٥ ت ذسع اػت و ثب ا ب ٤ ت ب ٣ ا ىب بت آ دا ا ب ك ست شفت. ثب ػپبع اص و ٥ اػوب ٢ ش ط ت ٥ ه دا اىذ ػ ا ص ٤ ؼات ٣ دا ا ب تشث ٥ ت ذسع ث ت ب ٣ مم ٥ ؼ ٥ ش مبث ثب ػش ب تمذ ٤ ٣ شدد. مىابع [1] Cullen BR. Derivation and function of small interfering RNAs and micrornas. Virus Res 2004; 102(1): 3-9. [2] Liu X, Fortin K, Mourelatos Z. MicroRNAs: biogenesis and molecular functions. Brain Pathol 2008; 18(1): [3] Lee RC, Feinbaum RL, Ambros V. The C. elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14. Cell 1993; 75(5): [4] Reinhart BJ, Slack FJ, Basson M, Pasquinelli AE, Bettinger JC, Rougvie AE, Horvitz HR, Ruvkun G. The 21-nucleotide let-7 RNA regulates developmental timing in Caenorhabditis elegans. Nature 2000; 403(6772): [5] Brennecke J, Stark A, Russell RB, Cohen SM. Principles of microrna-target recognition. PLoS Biol 2005; 3(3): e85. [6] Garofalo M, Croce CM. micrornas: Master regulators as potential therapeutics in cancer. Annu Rev Pharmacol Toxicol 2011; 51: [7] Esquela-Kerscher A, Slack FJ. Oncomirs - micrornas with a role in cancer. Nat Rev Cancer 2006; 6(4): [8] Lu J, Getz G, Miska EA, Alvarez-Saavedra E, Lamb J, Peck D, Sweet-Cordero A, Ebert BL, Mak RH, Ferrando AA, Downing JR, Jacks T, Horvitz HR, Golub TR. MicroRNA expression profiles classify human cancers. Nature 2005; 79 Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, Vol. 18 ( ), N0. 1 9;
14 میىا زماوی ي مکاران (7043): [9] Babashah S, Soleimani M. The oncogenic and tumour suppressive roles of micrornas in cancer and apoptosis. Eur J Cancer 2011; 47(8): [10] Yao Z, Mishra L. Cancer stem cells and hepatocellular carcinoma. Cancer Biol Ther 2009; 8(18): [11] Meng F, Henson R, Wehbe-Janek H, Ghoshal K, Jacob ST, Patel T. MicroRNA-21 regulates expression of the PTEN tumor suppressor gene in human hepatocellular cancer. Gastroenterology 2007; 133(2): [12] Coulouarn C, Factor VM, Andersen JB, Durkin ME, Thorgeirsson SS. Loss of mir-122 expression in liver cancer correlates with suppression of the hepatic phenotype and gain of metastatic properties. Oncogene 2009; 28(40): [13] Gramantieri L, Fornari F, Ferracin M, Veronese A, Sabbioni S, Calin GA, Grazi GL, Croce CM, Bolondi L, Negrini M. MicroRNA-221 targets Bmf in hepatocellular carcinoma and correlates with tumor multifocality. Clin Cancer Res 2009; 15(16): [14] Su H, Yang JR, Xu T, Huang J, Xu L, Yuan Y, Zhuang SM. MicroRNA-101, down-regulated in hepatocellular carcinoma, promotes apoptosis and suppresses tumorigenicity. Cancer Res 2009; 69(3): [15] Wang B, Majumder S, Nuovo G, Kutay H, Volinia S, Patel T, Schmittgen TD, Croce C, Ghoshal K, Jacob ST. Role of microrna-155 at early stages of hepatocarcinogenesis induced by choline-deficient and amino acid-defined مجل عل م پسشکی مدرس: آسیب شىاسی زیستی دير 18 شمار 1 ب ار 1314 diet in C57BL/6 mice. Hepatology 2009; 50(4): [16] Xiong Y, Fang JH, Yun JP, Yang J, Zhang Y, Jia WH, Zhuang SM. Effects of microrna-29 on apoptosis, tumorigenicity, and prognosis of hepatocellular carcinoma. Hepatology 2010; 51(3): [17] Braconi C, Valeri N, Gasparini P, Huang N, Taccioli C, Nuovo G, Suzuki T, Croce CM, Patel T. Hepatitis C virus proteins modulate microrna expression and chemosensitivity in malignant hepatocytes. Clin Cancer Res 2010; 16(3): [18] Pineau P, Volinia S, McJunkin K, Marchio A, Battiston C, Terris B, Mazzaferro V, Lowe SW, Croce CM, Dejean A.. mir-221 overexpression contributes to liver tumorigenesis. Proc Natl Acad Sci U S A 2010; 107(1): [19] Teiten MH, Eifes S, Dicato M, Diederich M. Curcumin-the paradigm of a multi-target natural compound with applications in cancer prevention and treatment. Toxins (Basel) 2010; 2(1): [20] Babaei E, Sadeghizadeh M, Hassan ZM, Feizi MA, Najafi F, Hashemi SM. Dendrosomal curcumin significantly suppresses cancer cell proliferation in vitro and in vivo. Int Immunopharmacol 2012; 12(1): [21] Tahmasebi Mirgani M, Isacchi B, Sadeghizadeh M, Marra F, Bilia AR, Mowla SJ, Najafi F, Babaei E. Dendrosomal curcumin nanoformulation downregulates pluripotency genes via mir-145 activation in U87MG glioblastoma cells. Int J Nanomedicine 2014; 9: [22] Sarbolouki MN, Parsaee S, Kosary P. Mixed :7
15 شن کىترل درينزاد در مطالعات بیان mir ا تحت تیمار با ک رک میه 81 micelle proliposomes for preparation of liposomes containing amphotericin B, in-vitro and ex-vivo studies. PDA J Pharm Sci Technol 2000; 54(3): [23] Sadeghizadeh M, Ranjbar B, Damaghi M, Khaki L, Sarbolouki MN, Najafi F, Parsaee S, Ziaee AA, Massumi M, Lubitz W, Kudela P, Paukner S, Karami A. Dendrosomes as novel gene porters-iii. J Chem Technol Biotechnol 2008; 83: [24] Sarbolouki MN, Sadeghizadeh M, Yaghoobi MM, Karami A, Lohrasbi T. Dendrosomes: a novel family of vehicles for transfection and therapy. J Chem Technol Biotechnol 2000; 75: [25] Alizadeh AM, Khaniki M, Azizian S, Mohaghgheghi MA, Sadeghizadeh M, Najafi F. Chemoprevention of azoxymethane-initiated colon cancer in rat by using a novel polymeric nanocarrier--curcumin. Eur J Pharmacol 2012; 689(1-3): [26] Tahmasebi Mirgani M, Sadeghizadeh M, Najafi F, Mowla SJ. Dendrosomal curcumin induced apoptosis by suppression of pluripotency genes in 5637 bladder cancer cells. Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, 2013; 16(1): (Persian) [27] Panahi A, Nakhaisistani R, Sadeghizadeh M. Evaluation of Apoptosis Induction on Gastric cancer AGS Cells Made by Polymer Nano Curcumin. Police Teb J 2012; 3(1): (Persian) [28] Zamani M, Sadeghizadeh M, Behmanesh M. Dendrosomal curcumin upregulates the expression of long non-coding RNA gene MEG3 in U87MG glioblastoma cells. Modares Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, Vol. 18 ( ), N0. 1 Journal of Medical Sciences: Pathobiology., In press. (Persian) [29] Vandesompele J, De Preter K, Pattyn F, Poppe B, Van Roy N, De Paepe A, Speleman F. Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes. Genome Biol 2002; 3(7): RESEARCH0034. [30] Warrington JA, Nair A, Mahadevappa M, Tsyganskaya M. Comparison of human adult and fetal expression and identification of 535 housekeeping/maintenance genes. Physiol Genomics 2000; 2(3): [31] Takamizawa J, Konishi H, Yanagisawa K, Tomida S, Osada H, Endoh H, Harano T, Yatabe Y, Nagino M, Nimura Y, Mitsudomi T, Takahashi T. Reduced expression of the let-7 micrornas in human lung cancers in association with shortened postoperative survival. Cancer Res 2004; 64(11): [32] Pineles BL, Romero R, Montenegro D, Tarca AL, Han YM, Kim YM, Draghici S, Espinoza J, Kusanovic JP, Mittal P, Hassan SS, Kim CJ. Distinct subsets of micrornas are expressed differentially in the human placentas of patients with preeclampsia. Am J Obstet Gynecol 2007; 196(3): 261.e1-6. [33] Iorio MV, Visone R, Di Leva G, Donati V, Petrocca F, Casalini P, Taccioli C, Volinia S, Liu CG, Alder H, Calin GA, Ménard S, Croce CM. MicroRNA signatures in human ovarian cancer. Cancer Res 2007; 67(18): [34] Mattie MD, Benz CC, Bowers J, Sensinger K, Wong L, Scott GK, Fedele V, Ginzinger D, Getts R, Haqq C. Optimized high-throughput microrna expression profiling provides novel :7
16 میىا زماوی ي مکاران biomarker assessment of clinical prostate and breast cancer biopsies. Mol Cancer 2006; 5: 24. [35] Calin GA, Corce CM. MicroRNA signatures in human cancers. Nat Rev Cancer 2006; 6: [36] Peltier HJ, Latham GJ. Normalization of microrna expression levels in quantitative RT- PCR assays: identification of suitable reference RNA targets in normal and cancerous human solid tissues. RNA 2008; 14(5): [37] Davoren PA, McNeill RE, Lowery AJ, Kerin MJ, Miller N. Identification of suitable endogenous control genes for microrna gene expression analysis in human breast cancer. BMC Mol Biol 2008; 9: 76. [38] McDermott AM, Kerin MJ, Miller N. Identification and validation of mirnas as endogenous controls for RQ-PCR in blood specimens for breast cancer studies. PLoS One 2013; 8(12): e مجل عل م پسشکی مدرس: آسیب شىاسی زیستی دير 18 شمار 1 ب ار 1314 :7
نااطمینانی تورمی و رشد اقتصادی در ایران
نااطمینانی تورمی و رشد اقتصادی در ایران * دوتش غال شهب ػجبػ ٣ 1 ** دوتش اؿىب سض ٥ صاد *** دا د ػ ب ٣ 3 زى ٥ ذ ت س ٤ ب ث ػجبست ٣ افضا ٤ ؾ ػ ص ػ ٣ ل ٥ ت ب اص خ تغ ٥ ش ب تبث ٥ ش زاس دس التلبد ش و س اػت و
More informationEvaluation of Poly(amidoamine) Dendrimer Surface Modification with Poly(ethylene glycol) on Cytotoxicity Reduction
Original Article Evaluation of Poly(amidoamine) Dendrimer Surface Modification with Poly(ethylene glycol) on Cytotoxicity Reduction Farnoush Jafari Iri Sofla 1, Fatemeh Rahbarizadeh 2*, Davoud Ahmadvand
More informationIELTS Writing. HIRAD Specialized Language Center
LESSON ONE ADJECTIVE CLAUSE ؿج خ كفي )ه بيش ك ي( ؿج خ كفي يه اػ سا ت كيف يو ذ. ث بی صيش ت خ و يذ: پؼشی پؼشی و و پيشا ىي پ ؿيذ د ػت ك ي ي اػت. يخ ا ي ثب ا اصد اج و ي خي ي دة اػت. The boy who is wearing
More informationعوتال خزاسب ی هجید عببسپ ر 1. عض یئت علوی دا شگب هحیطسیست
ش ١٤ ح ٥ ط ص ٤ ؼت طج ٥ ؼ ٣ بثغ طج ٥ ؼ ٣ ا ٤ شا د س ٠ 67 ؿ بس ٠ 2 تبثؼتب 1393 كفحبت 195-206 ضز رت ب الشاهبت ببس گزی را بزد بی حفبظت اس ت ع سیس یت ایزاى چکید *1 اصغز هحودی فبضل 2 عوتال خزاسب ی 3 هجید عببسپ
More informationCURRICULUM VITAE ALI SABETIPOOR
Name: Ali Sabetipoor Username: asabeti URL: http://asabeti.kashanu.ac.ir Email: a.sabeti@kashanu.ac.ir Tel.: +98 31 5591 2733 Fax: +98 31 5551 3015 Address: Faculty of Literature and Foreign Languages,
More informationEvaluating the cytotoxic effect of crocin on MDA-MB-468 cell line based on apoptosis induction, ER stress, and autophagy markers
Original Article Evaluating the cytotoxic effect of crocin on MDA-MB-468 cell line based on apoptosis induction, ER stress, and autophagy markers Hamid Heidarzadeh 1, S. Zahra Bathaie 2*, Saeid Abroun
More informationظزی ک تزل اجتواعی تا گا ت آیات قزآى ر ایات تا تأکیذ تز تعا ى حوایت
فصلنامه مطالعات قرآنی سال نهم شماره 33 بهار 9317 صص 39-111 ظزی ک تزل اجتواعی تا گا ت آیات قزآى ر ایات تا تأکیذ تز تاریخ دریافت: 31/5/11 تاریخ پذیزش: 31/8/1 چکیذ تعا ى حوایت * فیس هت لی ساد ایی ی اػال د
More informationاط ا چگ هؼ ه د ذ ت هؼشف س ىشد خذ ذ دس تاب مؾ اط ا د گش احذ ا صتا دس
سال سوم- شماره 6- پاییز و زمستان 9 معرفی و نقد اى ا ا ض واژهها چگونه معنی میدهند: مفاهیم واژگانی الگوهای شناختی و ساختار معنی آوؼف سد: ا تاسات دا گا آوؼف سد )009(. ساحل گ ذهىاس اط ا چگ هؼ ه د ذ ت هؼشف
More informationثزرسی تبثیز هذیزیت سزهبی در گزدش ثز عولکزد هبلی ضزکت بی پذیزفت ضذ در ث رس ا راق ث بدار ت زاى
ثزرسی تبثیز هذیزیت سزهبی در گزدش ثز عولکزد هبلی ضزکت بی پذیزفت ضذ در ث رس ا راق ث بدار ت زاى ه زداد کبکبعلی ص هع سزایی* دکتزهحسي هحوذ رثخص ل گز دی ** دکتز ضبعز ثیبثب ی ** کبرض بس ارضذ هذیزیت ثبسرگب ی گزایص
More informationة ة ف ف ي ف ل ف ن ا م ا
س د رة ت ا ر س ٱ ت خ ل ا ا ة ر ه ب ا ب ث ا ع ل أ ب ع ر و ة ا ل ه ة ة ا ل ب ل ل س ال ا ص ر ل ا ة ح ت غ ل و ك ا ر ب ر و ش ا ر ء ل ل ة ل ا ل ك ة ا خ س س ل ا ل ب ط ت ل ة ا و ل ا د ة و ك ل ة ة ل ز ا إ ل ة ع
More informationپژ ص ای هذیزیت عو هی سال ن ضوار سی چ ارم سهستاى 1335 تاریخ دریافت: 35/3/6 تاریخ پذیزش: 35/8/3
پژ ص ای هذیزیت عو هی سال ن ضوار سی چ ارم سهستاى 1335 صفح 115-134 تاریخ دریافت: 35/3/6 تاریخ پذیزش: 35/8/3 Investigating the Relationship between Quality of work life(qwl) and Professional Ethical Culture
More informationWelcome to ALI 440: Topical Tafsir of Quran Family Relationships
Welcome to ALI 440: Topical Tafsir of Quran Family Relationships Check the following verses in your copy of the Quran Verses for today s session 1) Sura Nur, no.24, verse 36 2) Sura Nahl, no.16, verse
More informationRace to Jannah - 6 Group E: Surah Taha
طھ{ 1 } Race to Jannah - 6 Group E: Surah Taha ب س م ال رح م ن ال رح یم In the name of Allah, the Most Gracious, the Most Merciful م ا أ ن ز ل ن ا ع ل ی ك ال ق ر آن ل ت ش ق ى إ لا ت ذ ك ر ة ل م ن ی خ ش
More informationABSTRACT The Title: The contribution of the Endowment in supporting the Scientific an Educational Foundations in Makkah Al-Mukarram during Othmani
ج ABSTRACT The Title: The contribution of the Endowment in supporting the Scientific an Educational Foundations in Makkah Al-Mukarram during Othmani Era and the suggested Techniques to Develop its Role
More informationFasting. Fr. Andrew Khalil
Fasting Fr. Andrew Khalil Fasting Oldest Commandment Prophets, Priests, Churches fasted. Old and New The Ninevites fasted Fasting John the Baptist and his disciples fasted The Lord fasted Our Holy Fathers
More informationRevealed in Mecca. Consist of 34 verses LESSONS FROM LUQMAN. Br. Wael Ibrahim. How can we implement the lessons in our daily lives?
Revealed in Mecca Consist of 34 verses LESSONS FROM LUQMAN Br. Wael Ibrahim How can we implement the lessons in our daily lives? The Chapter of Child Education The chapter is about Luqman s education and
More informationتوانايی استدالل اخالقی دانشجويان پرستاری دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی يزد
دوره ایران 27 شماره -19 19 آبان و دی ماه -991 9313 992 چکیده توانايی استدالل اخالقی دانشجويان پرستاری دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی يزد 1 فریبب بر بوی 2 *سید ال بم فضل ج 3 عببس عببس زاد زمینه و هدف: ح
More informationأ ا ل ا ا ا أو و ا ا د أ ا ل ا ة ا رة إ ا ص ذوي ا أو ا ت ا ا ص ذوي ا ا ا وق ا ارد ا أ ب ا ر ا ا ا 1 2 3 4 5 ا أس إ ا م رة ا ا إ ا م و ر»ا «ا ت زاو ا راع ا إ ا راء إ ا ا و ا ا ة ا م ا ا ا ا را م ا ا وأن
More informationMarzieh Salehi 1, Sadegh Babashah 2*, Sirous Zeinali 3. Original Article
Original Article Expression Levels of Key Components of the Hedgehog Pathway and an Investigation of the Correlation of this Pathway with Expression Levels of Claudin-1 in Invasive Breast Carcinoma Marzieh
More informationماهنامه علمی پژوهشی مهندسی مکانیک مدرس. mme.modares.ac.ir
مجله مهنذسی مکانیک مذرس خرداد 6931 دوره 61 شماره 9 صص 93-63 ماهنامه علمی پژوهشی مهندسی مکانیک مدرس mme.modares.ac.ir بررسی نتایج مذلسازی چنذشعاعی با مذل تکشعاعی در جریان بخار آب چگالشی در نازل همگرا-واگرای
More informationتزرسی اثز فشای د عاهل سا پذیزی تز قدرت ت ضیحد دگی هدل س عاهلی فاها فز چ در ت رط ا راق ت ادار ت زاى
راهبرد مديريت مالي سال اول شماره 3 زمستان 1392 صص 89110 دانشگاه الشهزا )س( دانشكده علوم اجتماعي و اقتصادي تاريخ دريافت: 92/8/11 تاريخ تصويب: 92/9/23 تزرسی اثز فشای د عاهل سا پذیزی تز قدرت ت ضیحد دگی هدل
More informationTable 1: Level of evidence (LE) Type of evidence. Table 2: Grade of recommendation (GR) Nature of recommendations
Table 1: Level of evidence (LE) Level Type of evidence 1a Evidence obtained from meta-analysis of randomized trials 1b Evidence obtained from at least one randomized trial 2a Evidence obtained from one
More informationSESSION 31 FREQUENT RECITATIONS. I. SPOKEN ARABIC: Use 3SP. For continuity, see Spoken Arabic in previous lesson.
SESSION 31 FREQUENT RECITATIONS I. SPOKEN ARABIC: Use 3SP. For continuity, see Spoken Arabic in previous lesson. () cold. water I want II. GRAMMAR (Verb DF-3): Practice the 21 forms of ج اه د 31 (he struggled;
More informationDua Mujeer 13, 14, 15. th th th.
Dua Mujeer th th th 13, 14, 15 www.qfatima.com DUA AL MUJEER Recommended to recite in the Ayyamul Baydh (13, 14, 15 th nights) of the month of Ramadhan. The Prophet (pbuh) was praying at Maqami Ibraheem
More informationن ن ار ن ل ا ة ل ا س ر ة رع م ا ءا ل ع ل ا ة أ ن ل
ا س ا ل ة ا غ ل أ ا لعل ا ء ال ا ع ل ب ة عح ت د ا ا ل د ل و ش و و ش ا ء ل ل ة ل ا ل ك ة ا خ س ل ا ل ب ط ت ة ا و ل ا ع د ة و ك ا ل ة ة ل ة ا إ ل ت ع ا ل ع ا ل ك ة ت ب ا ا ل ح ب ص ال ا ت س ع ل ة ا و حل و
More informationدیدگاه دانشجویان بهداشت عمومی دانشگاه علوم پزشکی کردستان در مورد رشته تحصیلی و آینده شغلی و عوامل مرتبط با آن سال 1393
دیدگاه دانشجویان بهداشت عمومی دانشگاه علوم پزشکی کردستان در مورد رشته تحصیلی و آینده شغلی و عوامل مرتبط با آن سال 1393 * احمد وهابی بشری وهابی اسماء خاطری مریم میرزایی مهیه احمدیان چکیده مقدمه و هدف :
More informationتاثیر اهید درها ی ب ؼی گر ی بر ب ب د ابعاد کیفیت ز دگی بیواراى هبتال ب ه لتیپل اظکلر زیط
فصل اه عین ت درظتی دا ؽکد عل م پسؼکی دا ؽگا آزاد اظالهی احد ظاری د ر 3 ؼوار تابعتاى 393 صفحات تا تاثیر اهید درها ی ب ؼی گر ی بر ب ب د ابعاد کیفیت ز دگی بیواراى هبتال ب ه لتیپل اظکلر زیط * جاظن ب راهیاى
More informationچطنانذازهذيريتدولتي هذلرياضيبودجهريسيدربخصعووهي:رويكردبهينهسازياستوار
ی ب چطنانذازهذيريتدولتي 1390 ص ستب 8 ض بس 83-98 ظظ هذلرياضيبودجهريسيدربخصعووهي:رويكردبهينهسازياستوار 1** * سجادنجفي عادلآرر چكيذه سؾبیت ث زا است و س ش بی ثش جت ی تدشثی ر ی غب جب بثى تخػیع ا ش ص و ی هشی
More informationCurriculum Standards: 7.7.1, 7.7.2
Curriculum Standards: 7.7.1, 7.7.2 Objectives: - Describe and draw typical animal and plant cells. يطف يسس ا خ ت ا س ا ت ا بات ت - Know that cells are the basic building blocks of organisms and form tissues
More informationOur bodies & health is a trust & gift from Allah, therefore we must use it responsibly, not waste it, and maximise its benefit. Muslims/Asians are
اى ح ذ ى ي اى ذ ت ع ا ب ع ت اى ع اف ت و ؤ ش ه ذ ؤ ى ا إ ى إ ى ا اىي و ح ذ ى ا ش ز ل ى و ؤ ش ه ذ ؤ ط ذ ا و ب ا ح ذ ا ع ب ذ اىي و ر ط ىى ؤ ر ط ي ر ب ب خ ز اىذ ا و اى أخ ز ة ص ي اىي و ط ي و ب ار ك ع ي و ع
More informationALI 340: Elements of Effective Communication Session Six
Communication Session Six Imam Zaynul Abidin (a) when asked about speaking or silence, which was better, he said: For each of these two there are harms and when they are both safe from harm speaking is
More informationContents. Transliteration Key إ أ) ء (a slight catch in the breath) غ gh (similar to French r)
Transliteration Key إ أ) ء (a slight catch in the breath) غ gh (similar to French r) (ئ f ف a ا throat) q (heavy k, from the ق b ب t ة) has an h sound at the end of k ك ة, ت a sentence) l ل thorn ) th
More informationITA AT: TO OBEY HIM WITHOUT QUESTION
ITA AT: TO OBEY HIM WITHOUT QUESTION جل جلالهAllah sent the Anbiya to be obeyed. This makes logical sense because this is the first principle of change, that the change must be implemented for people to
More informationISTIGHFAAR Combined with The 99 Names of Allah
ISTIGHFAAR Combined with The 99 Names of Allah kwdwdsadsadsdsdfsfdswthis is a simple short Istighfaar formula to attain closeness to Allah and forgiveness of sins. The benefit of this formula is that a
More informationQUR ANIC ARABIC - LEVEL 1. Unit ٢٦ - Present Passive
QUR ANIC ARABIC - LEVEL 1 Unit ٢٦ - Present Passive 1 Today s lesson Present Passive Classwork Unit 26 Correction Unit 21, 22, 23, 24 2 ا ل ف ع ل - Verb Present tense action is incomplete a) either being
More informationطزاحي مذل مصزف کالن یک کش ر اسالمي با استفاد اس ريیکزد مذلساسی تفسیزی ساختاری )ISM( ك ى ت ف ا ٣ تق ا ٣ تو
فصلناهه سیاستهای راهبردی و کالى / سال سوم شواره دهن تابستاى 499/ صفحات 69-88 طزاحي مذل مصزف کالن یک کش ر اسالمي با استفاد اس ريیکزد مذلساسی تفسیزی ساختاری )ISM( 2 ك ى ت ف ا ٣ تق ا ٣ تو تاریخ دریافت: 9/8/5
More information9. What is Satan? Is Satan Iblis?
9. What is Satan? Is Satan Iblis? Presently there is no clear understanding of Satan in the Muslim community. We also do not know how Satan influences our minds to mislead us from the path of Allah. Religious
More informationQur'anic Stories. ALII 209: Deriving Lessons from
COURSE OBJECTIVE: DERIVE ETHICAL LESSONS through: 1) Reciting & pondering over select passages 2) About stories of past prophets & people 3) Referring to renown tafaseer (commentaries) 4) Discussing related
More informationSarf: 16 th March 2014
Sarf: 16 th March 2014 Sarf = How verbs change ي ا ل ف ع ل ال م اض = verb Past tense ا ل ف ع ل ال م ض ا = verb Present tense ا ل ف ع ل ال م اض ي = verb Past tense You 1m You 2m You 3+m You 1f ف ع ل ف ع
More informationبررسی کیفیت خدهات ارائ شد دردرها گا ای سرپایی بیوارستا ای دا شگا عل م پزشکی ت راى براساس الگ ی سر ک ال درسال 49
ال ام حق ش اس وکاراى 9.. بررسی کیفیت خدهات ارائ شد دردرها گا ای سرپایی بیوارستا ای دا شگا الهام حق شناس 1 محمد عرب 2 عباس رحیمی فروشانی 3 الهام موحد تاریخ دریافت 99/4/72 : 4 تاریخ پذیزش 99/9/1 : چكیده
More informationAllah accepts only from the pious. (5:27)
ه ح ي ا ع ف ق ح د أ ن ل ع ف ح ضل ال شام ل ه و إ ح حساى ال ح ك م ل ل ع ه و ح حد ه ال ش يك ح ن ال إ هل إ ه ال ا ل ل د ح شه أ ال ح هد ل ل ان و ص ي ان و أ ض ق ي ام ر م و أ ح شه د أ ه ن س ي د ى ا و ى ب ه يي
More informationCombined Effect of Swimming Training and Arbutin Supplementation on Kidney Total Oxidant and Antioxidant Status in Alloxan-induced Diabetic Rats
Short Communication Combined Effect of Swimming Training and Arbutin Supplementation on Kidney Total Oxidant and Antioxidant Status in Alloxan-induced Diabetic Rats Maryam Zolfalipor 1, Parvin Farzanegi
More informationCommon Supplications (Du aas) recited during the Day
, Most Beneficent, Most Merciful Common Supplications (Du aas) recited during the Day www.understandquran.com ***** After getting up ***** ال حم د ال ذ ي ح يانا gave us life Who to Allah بع د ما ماتنا
More informationعوامل اجتماعی مؤثر بر گرایش به سساریه درزوان باردار
ی ا ی ا ی ا ی ا ی / 541 فصلنامه اخالق پزشكي هفتم شماره بیستونهم پاییز 3131 عوامل اجتماعی مؤثر بر گرایش به سساریه درزوان باردار 1. فض یأت ف ی دا ا ا ض شا دا ىذ ف اخت افی التلادی ش غا قات ص ا خا اد ت شا
More informationAyatul Kursi (2: )
Ayatul Kursi (2:255-257) Ayatul Kursi (2:255-257) & Aamenar Rasul (2:285, 286) My Ayatul Kursi & Aamenar Rasul Workbook www.qfatima.com Name: AYATUL KURSI Suratul Baqara 2:255 257 The verse of the 'Throne'
More informationبزرسی خواص آنتی اکسیدانی و ضد ببکتزیبیی اسبنس جعفزی بز روی تعدادی اس ببکتزیهبی عبمل فسبد و بیمبریسای غذایی
مجله مکروب شن مواد غذا ئ بزرس خواص آنت اکسدان و ضد ببکتزب بنس جعفز بز رو تعداد ببکتزهب عبمل چکده فسبد و بمبرسا غذا 3 * رضب شزافت چبلشتز محمود رفعبن کوپبئ عل شزافت چبلشتز الهبم صبلح. شوض تحممبت ث ؿ تغز
More informationAdab 1: Prohibitions of the Tongue. Lecture 6
Adab 1: Prohibitions of the Tongue Lecture 6 1 Prohibitions In previous lectures we have established the grounds for why this book is important. Dangers of the tongue Rewards and benefits of the silent
More informationدا طد ی وبسض بسی اسضذ سضت ذیشیت ثبصس ب ی دا ط ب ػ تحمیمبت احذ بص ذسا
چکیده : ای یب عوامل موثر بر ارزش ویژه برند مبتنی بر مشتری دکتر جمطیذ ساالر استبدیبس دا ط ب پیب س حسیه علیخان گرگاوی ي یل دا طد ی وبسض بسی اسضذ ثبصاسیبثی دا ط ب آصاد اسال ی سضت اهلل جعفری الکامی Valiolah.jafari@yahoo.com
More informationALI 256: Spiritual and Jurisprudential aspects Salaat
ALI 256: Spiritual and aspects Salaat SESSION 3: Al-Sadiq Seminary Surrey, BC March 1, 2014/ Rabi II 29, 1435 1 Getting closer thru Du ā, 2:186 و إ ذ ا س أ ل ك ع ب اد ي ع ي ن ف إ ي ن ق ر يب أ ج يب د ع
More informationSubmission is the name of an Attitude
Submission is the name of an Attitude Mirza Yawar Baig Children are taught in kindergarten that A is for apple. If they go to Islamic school they are taught that it doesn t stand for apple but for.جل جلالهAllah
More informationALI 258: Qualities of a Faithful believer Khutba No. 87 March 25, 2014/ Jumadi I 23, 1435
ALI 258: Qualities of a Faithful believer Khutba No. 87 March 25, 2014/ Jumadi I 23, 1435 What is the difference between faith and conviction? What are good qualities of speech and silence? How would you
More information(When he said to his father and his people: "What do you worship'') meaning: what are these statues to which you are so devoted
ASH-SHU'ARA (69-110) How the Close Friend of Allah, Ibrahim spoke out against Shirk و ات ل ع ل ي ه م ن ب ا إ ب ر ه يم - إ ذ ق ال لا ب يه و ق و م ه م ا ت ع ب د ون - ق ال وا ن ع ب د أ ص ن اما ف ن ظ ل ل ه
More informationتبریخ دریبفت: 1397/03/09 تبریخ پذیزش: 1397/06/17 1. IJOGI, Vol. 21, pp , Sep 2018 و یسىذ مسئ ل مکبتببت: پست الکتزيویك: تلفه:
ی ب IJOGI, Vol. 2, pp. 9-28, Sep 208 دوره بیست و یکم صفحه: 9-28 ویژهنامه شهریور ماه 397 مزيری بز را کبر بی حفظ ببريری بیمبران سزطبوی در درمبن رایج دکتز ثزیب قبسمی دکتز فیزيس *2 ػل یبن د تشاي تخللي ط تيي
More informationآفح انكغم و انرغى ف. Procrastination, Laziness & Sedentary
ان ح ذ ن ه ان ز ي خ ه ق ا ي ط ني ث ى ق ض ى أ ج ال و خ ه ق ان ى خ و ان ح اج ن ث ه ى ا أ ا أ ح غ ع ال أ ح ذ ع ث ح ا ك ا ح ة و ش ض ى و أ ش ه ذ أ ال إ ن إ ال انه و ح ذ ال ش ش ك ن أ ق غ ى ت انه م و ان ه اس
More informationTo Memorise 1 out of 7
To Memorise 1 out of 7 Table of Contents Notes for the Guardian... 3 (The ages below are as per Islamic year):... 3 Level 1-Memorise... 4 (1)-Names of Allah azwj and the Blessed Five... 4 (2)- Nad-e-Ali
More informationAlHaaqqa. In the name of Allah, Most Gracious, Most Merciful Sahih Intl S. Maududi Yousuf Ali M. Pickthall Al-Quran 1. The Inevitable Reality.
AlHaaqqa In the name of Allah, Most Gracious, Most Merciful 1. The Inevitable Reality. Inevitable Reality? 3. And what can make you know what is the Inevitable Reality? 4. Thamud and Aad denied the striking
More informationWays the Misguided Youth Bent on Takfīr & Bombings
Ways the Misguided Youth Bent on Takfīr & Bombings Contradict Islam بذل النصح والتذكري لبقايا ااملفتونني بالتكفري والتفجري Title: Original Author: Abd al-muḥsin al- Abbād Source: http://islamancient.com/ressources/docs/101.doc
More informationحرکت فلکشه مفصل آروج با ورمافزار ADAMS
و 4 پض ص در ت ا بخطی رسضی د ر ضوار ب ار تابستاى 93...WW.WWAR.RWR.WWW نشریه پژوهش در توانبخشی ورزشی دوره شماره بهار و تابستان 93 - محاسبهی مىحىی گشتاير ایزيکیىتیک ي مقایسهی حرکت فلکشه مفصل آروج با ورمافزار
More informationIn the Name of Allah, the Most Gracious, the Most Merciful.
The Virtues of Surat At-Tariq Revealed in Makkah An-Nasa'i recorded that Jabir said, "Mu`adh lead the Maghrib prayer and he recited Al-Baqarah and An-Nisa'. So the Prophet said, أ ف تان أ ن ت ي ا م ع اذ
More informationHazrat Ameer s Ramadan Message
) P P س م الله ا ل ر حم ن ا ل ر ح ی م Hazrat Ameer s Ramadan Message 1432 Hijrah, August 2011 م ن كم ق ن ه د ى ل لن اس و بي ن ا ال ه دى و ال ف ر قان فم ن ش ه د ل ف یه ال ر آ ذ ي آ ش ه ر ر م ضان ال ه صلے
More informationStory #4 Surah Al-Qasas [Verses 76- ]
Story #4 Surah Al-Qasas [Verses 76- ] You need to feel the importance of each story in the Quran! Never think that the situation is not for you or doesn t apply to you! Every story mentioned in the Quran
More informationفیلم نانوورقهای گرافنی به روش رسوب پالسمای الکترولیتی
71 مجل م اد و يه/ جلد 7 /شمار 2/ زمستان 5931 فیلم نانوورقهای گرافنی به روش رسوب پالسمای الکترولیتی 2 1 1* 1 آػی حثیثی ػیذ هحوذ ه ػ ی خ ئی فشصاد هحث تی اهیشخاوضاد چکیده دس ایي پظ ؾ س ؽ پالػوای الىتش لیتی
More informationBenefits from the story of Prophet Yoosuf? (2)
Benefits from the story of Prophet Yoosuf? (2) All perfect praise is due to Allaah; I testify that there is nothing worthy of worship except Allaah and Muhammad is His Slave and Messenger, upon whom may
More information1 st 10 Nights and Days of Dhu l-hijjah
1 st 10 Nights and Days of Dhu l-hijjah Salaah for 1 st 10 Nights Dua after Fajr and Maghrib Prayers for the 1 st 9 Nights Dua for the 1 st 10 Days Tasbih to be Recited on the 1 st 10 Days Amaal for the
More informationبیماری پیچیدگي برگ هلو
دستورالعمل اجرايي كنترل بیماری پیچیدگي برگ هلو حجت اله رباني نسب محمد علي آقاجاني نسب محمد محمدی پور شماره فروست 50739 1395 وزارت جهادكشاورزی سازمان تحقیقات آموزش و ترويج كشاورزی موسسه تحقیقات گیاهپسشکي
More informationخ آبیص ت ز ػ ای اص پاسا تش ا و مادیش آ ا تشای ح ض سد ظش ؼثتا حاتت ت د ایا ش ضؼیت
قاتلیتهای ترناهه HEC-GeoHMS در استخراج پاراهترهای ههن حوزه آبخیس هطالعه هوردی ح ضهو گرگانرود استاى گلستاى چىیذ خص صیات فیضی شافی یه ح ص خ آبیص ت ز ػ ای اص پاسا تش ا و مادیش آ ا تشای ح ض سد ظش ؼثتا حاتت
More informationا ح د أ ز ح ا س اح ني ح ث ع ا ت س اح ث ا بس أ ج ع ني, أ ال إ إ ال ا و ح د ال ش س ه ا ه ا ح ك ا ج ني و أ ش ه د أ س د ب
ا ح د أ ز ح ا س اح ني ح ث ع ا ت س اح ث ا بس أ ج ع ني, و أ ش ه د أ ال إ إ ال ا و ح د ال ش س ه ا ه ا ح ك ا ج ني و أ ش ه د أ س د ب و ج ب ح د ا ع ج د ا و ز س ى, أ ا بس ل ج ب و أ و ث س ث س ا و ع ط ف ب ف ب ه
More informationمقایسه خصوصیات کمی و ارسش غذایی علوفه سه رقم تاج خزوس در مشارع استان البزس
ضوبر 20 پبييش 1395 ظظ: 31~42 طزي آه سضی- پض طی ه سس تحقيقبت ػل م داهیکط ر مقایسه خصوصیات کمی و ارسش غذایی علوفه سه رقم تاج خزوس در مشارع استان البزس اهيزرضب غفبيی ) یؼ ذ ؼئ ( اػتبدیبس ػؼ تحمیمبت ػ دا ی
More informationTHE RIGHTS OF RASOOLULLAH ON HIS UMMAH ARE 7:
THE RIGHTS OF RASOOLULLAH ON HIS UMMAH ARE 7: 1. Adab wa Ihtiraam: Our attitude of the utmost respect and honor; 2. Ita at: To obey him without question 3. Ittiba: To follow and emulate him in every way
More informationThe Principles of Imāmah in the Qurʾān
The Principles of Imāmah in the Qurʾān Learning Objectives Become familiar with important Qurʾanic verses relating to Imāmah Understand that only Allāh (SWT) has the right to choose His representatives
More informationQuestions & Answers Answers
Questions & Answers Code: Beliefs Cognition about God s Caliph on earth About Mansoor and his preparation of the grounds for advent of Mahdi 3 Author: Unknown Date: 20/01/2015 In case a ruler from one
More informationOil Sector Investment and Iranian Economic Development
The Introduction of New Iran Petroleum Contracts IPC Tehran 2015 Oil Sector Investment and Iranian Economic Development By: Masoud Nili Economic Advisor to the President of the Islamic Republic of Iran
More informationMadrasa Tajweedul Quran
Ijra - Explaining Tajweed Rules Notes for Teachers: Ijra of Tajweed rules is essential for pupils to fully understand the rules. Where pupils explain Tajweed rules in their own words, this creates a deeper
More informationSurah Mumtahina. Tafseer Part 1
Surah Mumtahina Tafseer Part 1 In the name of Allah the Gracious and Most Merciful 1. O you who have believed, do not take My enemies and your enemies as allies, extending to them affection while they
More informationSuggested Global Islamic Calendar By Khalid Shaukat, prepared for
Suggested Global Islamic Calendar By Khalid Shaukat, prepared for The Experts Meeting to Study the Subject of Lunar Months Calculation among Muslims Allah subhanahu wa ta ala says in Qur an: Rabat 9-10
More informationKeywords: Blood transfusion, Red blood cells, Methoxy polyethylene glycol, Succinimidyl valerate
Original Article Investigating the Stability of Polymer Coating of Methoxy Polyethylene Glycol Activated by Succinimidyl Valerate on the Surface of Red Blood Cells under In Vitro and In Vivo Conditions
More informationGoing for the ziyārah of the Ahl al-bayt (A)
CLASS 8 Going for the ziyārah of the Ahl al-bayt (A) Learning Objectives Why do we go for the ziyārah of the Ahl al-bayt (A)? What do we do when on ziyārah? Memorise verses 4:100 & 3:169 Going for ziyārah
More informationپیص بیىی الگ ی يريد بیمار ب بخص ايرشاوس بیمارستان با استفاد از تکىیک داد کايی ي مذل ضبک عصبی
محمذعلی افطارکاظمی ي مکاران?;.. پیص بیىی الگ ی يريد بیمار ب بخص ايرشاوس بیمارستان پیص بیىی الگ ی يريد بیمار ب بخص ايرشاوس بیمارستان با استفاد از تکىیک داد محمد علی افشار کاظمی 1 ندا بیگدلی* 2 ژیال منوچهری
More informationImamate and Wilayah, Part 7
Published on Books on Islam and Muslims Al-Islam.org (https://www.al-islam.org) Home > Imamate and Wilayah, Part 7 Imamate and Wilayah, Part 7 Authors(s): Mohammad Ali Shomali [3] Publisher(s): Ahlul Bayt
More informationIn the Name of Allah, the Most Compassionate, the Most Merciful. Classification Of THE INTERPRETATION OF HOLY QURAN BOOK THIRTY EIGHT FAMILY LIFE
In the Name of Allah, the Most Compassionate, the Most Merciful Classification Of ALMIZAN THE INTERPRETATION OF HOLY QURAN BY: Great Allameh Seyyed Mohammad Hossein Taba Tabaii BOOK THIRTY EIGHT FAMILY
More informationSirah of Sayyida Fatima al-zahraa d
Sirah of Sayyida Fatima al-zahraa d ALI 233 Session 3: Tuesday, JCC, Toronto 19 Jamadi II 1434/ 30 April 2013 1 Sûrah al-nahl, Ayat 58 & 59 ب سم الل ه الر مح ن الر حيم * و إ ذا ب ش ر أ ح د ه م ب األ نثى
More informationMuharram 23, 1439 H Ikha 14, 1396 HS October 14, 2017 CE
Muharram 23, 1439 H Ikha 14, 1396 HS October 14, 2017 CE Qalqalah ) ق ل ق لة ( is a method of reading a letter by vibrating it because it has sukoon. There are five qalqalah letters: د ج ب ط ق Two categories
More informationIslam and The Environment
Islam and The Environment By Sh Kazi Luthfur Rahman Human beings are representatives of Allah: Allah, the almighty appointed human beings as his representatives in this world and he made them responsible
More informationThe First Ten or Last Ten Verses of Sūrah al-kahf
K N O W I N G F A L S E M E S S I A H Protection from the Dajjāl s Tribulations Despite the great tribulations the Dajjāl brings by which Allah will test his servants, we are not left to face them alone.
More information1. In Islam there is NO hatred of others. WE DO NOT DIFFERENTIATE on Race, Ethnicity, Colour, Nationality or Religion.
اى ح ذ ى ي اى ز ي أ ز ه اى ن ت اب و ى ج ع و ى ع ى ج ا و ج ع و ى ات ق ا ف ش ج ا و خ ش ج ا و أ ش ه ذ أ ال إ ى إ ال اىي و ح ذ ال ش ش ل ى أ ز ه اى ق ش آ ذ ا ة و ىس ا و أ ش ه ذ أ س ذ ا و ب ا ح ذ ا ع ب ذ اىي
More informationQuran Spelling Bee Second Level (Third to fifth grade) competition words
Meaning Mercy Word From Quran 1. ر ح م ة And when و ل م ا. 2 That we are أ ن ا 3. Spelling Ra H a Meem Ta marbootah Fathatan, Waw Lam Meem Shaddah Alif Hamzah-on-Alif Noon Shaddah Alif The prophet Nooh(P.B.U.H)
More informationNone is killed unjustly, but the first son of Adam will have a part of its burden because he was the first to establish the tradition of murdering
ه ث ري ي ل ه ري ولع ق س ان وك ني خو اإل ن ال ا ل د ل ل رب اه ا ل له وح د ه ه ري ي وح ص ى د ق ف ه ظو وغ ن ال إ هل ه ال د وأش أ إ خ و ه د ا ها ب ي ا ه ن س ي د و م د أ ت ني وأ يك هل ال و ك ا ل ق ال ال ش ه
More informationFriday Sermon September 10 th 2010
A comprehensive discourse on various Qur anic prayers at the last day of Ramadan Friday Sermon September 10 th 2010 NOTE: Al Islam Team takes full responsibility for any errors or miscommunication in this
More informationDu ā 44 For Supplication for the Coming of the Month of Ramadan in the Sahīfa with two Translations
Du ā 44 For Supplication for the Coming of the Month of Ramadan in the Sahīfa with two Translations 1 Translation by Dr. William C. Chittick His Supplication For The Coming Of The Month Of Ramadan 1. Praise
More informationSunnah of the Month Eid Al - Adha & Hajj Hadith of the Month. The reward of Hajj Mabrur (accepted) is nothing but Al- Jannah.
August School Re-opens Fun Day Independence Day Eid ul Adha Holidays 1 st 11 th 14 th 9 th 12 th Zilhaaj Eid Al - Adha & Hajj ال ح ج ال م ب ر ور ل ي س ل ه ج ز اء إال ال ج ن ة The reward of Hajj Mabrur
More informationALI 241: Akhlāq of the Ahlul Bayt c
ALI 241: Akhlāq of the Ahlul Bayt c Session 3: JCC; Tuesday 11 Dhul Qa dah 1434/ September 18, 2013 1 From the course outline In the name of Allah, the Beneficent, the Merciful. Session 3: al-sidq and
More informationث غ ٱ ٱ ش ؽ ٱ ش ؽ ٤ ا ؾ ذ ٱ ز ١ ٤ ظ و ن بئ د اك غ ال ؼ ي بئ ب غ
Dua of Imam Husain (as) for the Day of Arafah The supplicatory prayer of Imam al-husayn (`a), the Chief of Martyrs, on the `Arafat Day is one of the famous prayers. Bishr and Bashir, the sons of Ghalib
More informationRabi`ul Awwal 13, 1439 H Fatah 2, 1396 HS December 2, 2017 CE
Rabi`ul Awwal 13, 1439 H Fatah 2, 1396 HS December 2, 2017 CE ح ر ك ات ( There are three basic vowels ( and they have to be read in short single ح ر ك ة stroke ١ stroke: upper ف ت ح ة 1. stroke: front
More informationل ى اكم ٤ بث ٣ آ ٥ ت پق ٤ ل ٢ ب ٢ ف بؿ اؿاك ٢ ؿك كؿ ز اىنا ؿتاى تطق ا قط ت
ل ى 1396 اكم ٤ بث ٣ آ ٥ ت پق ٤ ل ٢ ب ٢ ف بؿ اؿاك ٢ ؿك كؿ ز اىنا ؿتاى تطق ا قط ت ؽال ناك...) 02 ( فغ بؽتبك ت ى ٥ الت ٣ ثل ب لوت...) 70 ( فغ و تل ؿاؽ ٣ ث ٥ ل ٣ ثل ب لوت...) 20 ( فغ پل ت م ٢٤ ثلق...) 67 (
More informationHis supplication in Asking for Water during a Drought
ALI 226: Du as 19 and 23 Sahifa February 2013/ Rabi I & II, 1434 و ك ان م ن د ع ائ ه ع ل ي ه الس ل ام ع ن د ال اس ت س ق اء ب ع د ال ج د ب His supplication in Asking for Water during a Drought 1 Quiz on
More informationForty Ahadith on Salat
Published on Books on Islam and Muslims Al-Islam.org (https://www.al-islam.org) Home > Forty Ahadith on Salat Forty Ahadith on Salat Essence of Worship: Salat Publisher(s): The Islamic Education Board
More informationThe Virtues of Surah An-Nasr
The Virtues of Surah An-Nasr Revealed in Makkah It has been mentioned previously that - it (Surah An-Nasr) is equivalent to one-fourth of the Qur'an and that - Surah Az-Zalzalah is equivalent to one-fourth
More informationThe Virtues of Surah Al-Infitar
Revealed in Makkah The Virtues of Surah Al-Infitar An-Nasa'i recorded from Jabir that Mu`adh stood and lead the people in the Night prayer, and he made the recitation of his prayer long. So the Prophet
More informationALI 241: Akhlāq of the Ahlul Bayt c
ALI 241: Akhlāq of the Ahlul Bayt c Session 4: JCC; Tuesday 17 Dhul Qa dah 1434/ September 24, 2013 1 From the course outline In the name of Allah, the Beneficent, the Merciful. Session 4: Session 4: Tawādu
More informationChapter 26: The Sin of Favoritism Be Just With Your Children
!1 : The Sin of Favoritism Be Just With Your Children بسم اهلل الرحمن الرحيم It was narrated that An-Nu'man said: "My mother asked my father for a gift and he gave it to me. She said: 'I will not be contented
More information